【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人急性單核細胞白血病細胞；THP-1使用說明書
形態特性 單核細胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞對乳汁珠和激活的紅細胞有吞噬作用，無表面和胞質免疫球蛋白。 可以用佛波醇 TPA誘導單核細胞分化。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清，10%；0.05mM β-巰基乙醇
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
紅四氮唑沙保羅培養基 TTC-Sabourand,s Medium 250克 用于分離真菌，酵母菌等
三苯四唑瓊脂基礎 TTC Agar Base 250克 彎曲桿菌的TTC試驗
三苯四唑營養瓊脂 TCC Nutrient Agar 250克 用于細菌總數測定時防止菌落蔓延
三苯四唑*吐溫80營養瓊脂 TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 250克 用于化妝品中細菌總數測定
胰蛋白胨大豆*聚山梨酸酯瓊脂 TAT Broth 250克 化妝品微生物檢測
*培養基 Glycine Medium 250克 彎曲桿菌*耐受性試驗
快速硫化氫試驗瓊脂 H2S Test Medium 250克 彎曲桿菌的硫化氫試驗
脫氧核糖核酸酶甲基綠瓊脂基礎 Dnase Agar Base With Methyl Green 100克 用于細菌的DNA酶水解試驗
波爾頓肉湯 Bolton Selective Enrichment Broth 250克 彎曲桿菌的選擇性增菌培養
彎曲桿菌培養基基礎 CCDA Base 250克 彎曲桿菌的分離培養
Campy-Cefex瓊脂基礎 Campy-Cefex Agar Base 250克 用于彎曲桿菌的分離培養
LB肉湯 LB Broth 250克 用于分子生物學實驗中大腸桿菌的保存和培養
SCPB基礎 Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 250克 副溶血弧菌的選擇性增菌培養Vitamin D Binding protein 英文名稱： *結合蛋白抗體 ?0.2ml
VNN1 英文名稱： 血管非炎癥分子1抗體 ?0.1ml
Von Willebrand Factor 英文名稱： 血管假血友病因子/血管血友病因子抗體 ?0.1ml
VEGF-C 英文名稱： 血管內皮生長因子C型抗體 ?0.1ml
VAMP3 英文名稱： 囊泡相關膜蛋白3抗體 ?0.2ml
VPS18 英文名稱： 空泡分選蛋白18抗體 ?0.1ml
Phospho-Vimentin (Ser56) 英文名稱： 磷酸化波形蛋白抗體 ?0.1ml
Phospho-Vimentin(Ser82) 英文名稱： 磷酸化波形蛋白抗體 ?0.1ml
VAV1 英文名稱： 鳥苷酸轉換因子VAV1抗體 ?0.2ml
phospho-VAV1 (Tyr160) 英文名稱： 磷酸化鳥苷酸轉換因子VAV1抗體 ?0.1ml
phospho-VAV1 (Tyr174) 英文名稱： 磷酸化鳥苷酸轉換因子VAV1抗體 ?0.1ml
VWCE 英文名稱： VWCE抗體 ?0.2ml
