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上海撫生實業有限公司
人肝癌細胞;BEL-7404培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
產品名稱 | 人肝癌細胞;BEL-7404培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 人肝癌細胞;BEL-7404培養
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 用Northern blot方法,未能檢測到細胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表達。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:12,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12;FGA:21TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
液體改良馬丁培養基(含瓊脂) Martin Broth,Modified(Flour) 250克 生物制品真菌無菌檢驗
固體改良馬丁瓊脂培養基 Martin Solid,Modified 250克 生物制品無菌試驗的霉菌檢查
PABA培養基(需氧、厭氧菌) PABA Medium(Bacteria) 250克 磺胺類的無菌試驗用
PABA培養基(真菌) PABA Medium(Fungi) 250克 已經磺胺類及抗生素類藥物治療的患者血液等標本培養
聚山梨酯80培養基(需氧、厭氧菌) Tween80 Medium(Bacteria) 250克 油劑的無菌試驗
聚山梨酯80培養基(真菌) Tween80 Medium(Fungi) 250克 油劑的真菌無菌試驗
真菌瓊脂培養基 Fungi Agar 250克 生物制品真菌無菌檢驗
虎紅鈉鹽瓊脂培養基 Rose Bengal Agar 250克 生物制品真菌、酵母菌計數
沙氏瓊脂培養基 Sabouraud′s Agar 250克 用于真菌檢測XPB 英文名稱: DNA損傷修復酶ERCC3蛋白抗體 ?0.2ml
XRCC3 英文名稱: X射線修復交叉互補蛋白3抗體 ?0.2ml
XRCC4 英文名稱: X射線修復交叉互補蛋白4抗體 ?0.2ml
XTP4 英文名稱: 乙型肝炎病毒X蛋白反轉錄蛋白4抗體 ?0.2ml
CCBR1 英文名稱: 鈣離子通道阻端耐藥蛋白CCBR1抗體 ?0.1ml
XIAP 英文名稱: X-連鎖凋亡蛋白/連鎖凋亡抑制蛋白抗體 ?0.1ml
XBP1 英文名稱: 細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體 ?0.1ml
Hepatitis B virus X protein 英文名稱: 乙型肝炎病毒X蛋白HBX抗體 ?0.1ml
Hepatitis B virus X protein 英文名稱: 乙型肝炎病毒X蛋白HBX抗體 ?0.1ml
XAB2 英文名稱: XAB2蛋白抗體 ?0.2ml
XDH 英文名稱: 黃嘌呤氧化酶抗體 ?0.1ml
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