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上海撫生實業有限公司
人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]復蘇
形態特性 上皮
生長特性 貼壁生長
特征特性 HCT116是1979年M.Brattain等從患結腸癌的男性病人中分離的三株惡性細胞之一。 在半固體瓊脂糖培養基中形成克隆。 HCT116在無胸腺的裸鼠有致瘤性,形成上皮樣的腫瘤。
培養條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化5-10分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(9+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:7,10;D13S317:10,12;D16S539:11,13;D18S51:17;D19S433:12,13;D21S11:29,30;D2S1338:16;D3S1358:12,17,18,19;D5S818:10,11;D7S820:11,12;D8S1179:11,12,14;FGA:18,23;TH01:8,9;TPOX:8,9;vWA:17,22
同工酶
染色體
使用權限 A類
人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]復蘇細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]復蘇操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
PALCAM添加劑 PALCAM Supplement 1mg/支*10 添加到HB4188中,用于李氏菌的選擇性分離培養
LPM瓊脂 LPM Agar 250 用于單增李氏菌選擇性分離(加入七葉苷和檸檬酸鐵銨)(FDA標準)
Half –Fraser 培養基 Half-Fraser Medium 250 用于李氏菌的增菌培養(MERCK標準)
Half –Fraser 添加劑 Half-Fraser Supplement 5ml*2 添加到HB4190中,用于李氏菌的選擇性增菌培養
改良緩沖蛋白胨水(MBP) Modified Buffered Peptone Water 250 用于單增李氏菌前增菌培養
EB增菌液 EB Enrichment Broth 250 用于單增李氏菌選擇性增菌培養(SN標準)
Fraser 培養基 Fraser Medium 250 用于李氏菌的增菌培養(MERCK標準)
Fraser 添加劑 Fraser Supplement 5ml*2支 添加到HB4193中,用于李氏菌的選擇性增菌培養
UVM培養基 UVM Medium 250 用于李氏菌的增菌培養(MERCK標準)
UVM 添加劑1 UVM Supplement1 1ml*10支 添加到HB4195中,用于李氏菌的選擇性增菌培養
LM-137瓊脂 LM-137 Agar 250 用于膜濾法單增李氏菌選擇性分離(NEOGEN標準)SUFU/Suppressor of Fused 英文名稱: 抑制Hh信號通路蛋白SUFU抗體 ?0.2ml
SNAIL 英文名稱: Snail蛋白抗體 ?0.1ml
SARP1 英文名稱: 分泌細胞凋亡相關蛋白1抗體 ?0.2ml
SMARCD3 英文名稱: 肌動蛋白依賴染色質調控因子SMARCD3蛋白抗體 ?0.2ml
SLC25A6 英文名稱: 線粒體載體腺嘌呤核苷酸轉運蛋白6抗體 ?0.2ml
SODD 英文名稱: Bcl2結合抗凋亡蛋白4抗體 ?0.2ml
人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]復蘇C10orf27 英文名稱: 第10號染色體開放閱讀框27抗體 ?0.2ml
5-HTR2A 英文名稱: 5-羥色胺受體2A抗體 ?0.1ml
5 lipoxygenase 英文名稱: 5-脂氧合酶抗體 ?0.1ml
SH2B1 英文名稱: SH2B蛋白抗體 ?0.2ml
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