人高轉移肝癌細胞；HCCLM3特性來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
| 產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
| 人高轉移肝癌細胞；HCCLM3特性 | 貼壁生長 | 上海 | 3－5天 |
細胞名稱
形態特性 上皮細胞樣；胞質內有顆粒
生長特性 貼壁生長
特征特性 用人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠，進行3次肺轉移篩選，取肺轉移瘤建成皮下接種后高度自發性肺轉移的肝癌細胞系。
培養條件
傳代方法
傳代情況 PN
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 B類
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
D-環* 0.1g/支*2 加入250ml TSC瓊脂基礎中
產芽孢肉湯 Sporulation Broth 250 用于產氣莢膜梭菌的產芽孢培養
* Polymyxin B 1.2mg/支*5 用1ml無菌水溶解后添加于100ml HB0256中
多價蛋白胨-酵母膏 (PY) 培養基 Poly Peptone Yeast Extract Medium 250 用于產氣莢膜梭菌的培養(SN標準)
皰肉培養基基礎 Cooked Meat Medium Base 250 加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(GB標準)
皰肉牛肉粒 Dried Meat Particle 100 加入皰肉基礎中，配成皰肉培養基
卵黃瓊脂培養基基礎 Egg Yolk Agar Base 250 用于肉毒梭菌、產氣莢膜梭菌的分離培養（GB標準）
含鐵牛奶培養基 250 用于產氣莢膜梭菌的牛奶發酵試驗
梭菌鑒別瓊脂(DCA) Differentia Clostridial Agar 250 用于干燥食品的計數和培養(MERCK方法)
強化梭菌鑒別瓊脂(DRCA) Differentia Reinforced Clostridial Agar 250 用于食品和其它物質中梭菌的計數和培養(MERCK方法)Synaptojanin 英文名稱： 磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5G抗體 ?0.2ml
Synaptojanin 2 英文名稱： 磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5H抗體 ?0.2ml
phospho-NCF1 (Ser359) 英文名稱： 磷酸化嗜中粒細胞胞漿因子1抗體 ?0.1ml
Synapsin III 英文名稱： 神經突觸素3抗體 ?0.2ml
Synaptogyrin 1 英文名稱： 神經細胞囊泡循環蛋白1抗體 ?0.2ml
Synaptogyrin 3 英文名稱： 神經細胞囊泡循環蛋白3抗體 ?0.2ml
Synaptogyrin 4 英文名稱： 神經細胞囊泡循環蛋白4抗體 ?0.1ml
Semaphorin 5B 英文名稱： 跨膜蛋白SEMA5B抗體 ?0.2ml
SEMA6C 英文名稱： 軸突導向因子SEMA6C抗體 ?0.2ml
STK2 英文名稱： */*蛋白激酶2抗體 ?0.2ml
