【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肺粘液上皮樣癌細胞；NCI-H292使用說明書
形態特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 此細胞株源自肺粘膜上皮細胞癌的淋巴結轉移灶。 這個細胞系用化學合成培養基分離得到，并轉換成含血清培養液培養。 此細胞在培養時在亞顯微結構上保留了粘膜上皮細胞的特性，并表現出鱗狀分化的多種標記。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:11,12；D16S539:9,13；D18S51:16；D19S433:12,13.2；D21S11:28；D2S1338:21,24；D3S1358:16；D5S818:13；D7S820:10；D8S1179:11,14；FGA:22,26；TH01:8；TPOX:8,11；vWA:16,17
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
SRXN1 英文名稱： 硫氧還蛋白1抗體 ?0.2ml
STAM 英文名稱： 信號轉導銜接蛋白1抗體 ?0.2ml
phospho-SLK (Tyr530) 英文名稱： 磷酸化*蛋白激酶Fyn/同步原癌基因抗體 ?0.1ml
SPTLC2 英文名稱： *棕櫚酰轉移酶2抗體 ?0.2ml
Phospho-Smad3 (Ser425) 英文名稱： 磷酸化細胞信號轉導分子SMAD3抗體 ?0.1ml
Phospho-Smad3 (Ser208) 英文名稱： 磷酸化細胞信號轉導分子SMAD3抗體 ?0.1ml
Phospho-Smad2(Thr220) 英文名稱： 磷酸化細胞信號轉導分子SMAD2抗體 ?0.1ml
phospho-Alpha synuclein (Tyr125) 英文名稱： 磷酸化核突觸蛋白α抗體 ?0.1ml
phospho-Alpha synuclein(Ser129) 英文名稱： 磷酸化核突觸蛋白α抗體 ?0.1ml哥倫比亞血瓊脂基礎 Columbia Blood Agar Base 250 營養非常豐富，用各種細菌的基礎培養基(AFNOR EP IDF標準)
哥倫比亞MUG培養基 Columbia- MUG Medium 250 用于大腸桿菌的熒光檢測(SN標準)
高鹽察氏瓊脂 Salt Czapek Dox Agar 250 用于霉菌和酵母菌的計數(GB標準)
*卵黃培養基基礎 Egg-Yolk Mannitol Salt agar Base 250 用于*的分離培養(Japan方法)
*卵黃多粘菌素瓊脂基礎（MYP） Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 250 用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計數（GB.SN標準）
*高鹽瓊脂 Manitol Salt Agar 250 用于*的選擇性分離培養
*培養基 Glycine Medium 250 用于彎曲桿菌*耐受性試驗（GB標準）
改良沙氏瓊脂培養基 Sabouraud’s Agar，Modified 250 用于真菌檢測
改良綠色酵母菌和真菌肉湯 m-GREEN YEAST and FUNGI BROTH 250 用于飲料中真菌及酵母菌檢測(Acumedia方法)
改良V-P培養基 V-P Medium,Modified 250 用于蠟樣芽孢桿菌的V-P試驗(SN標準)
改良Skirrow氏瓊脂基礎 Skirrow Agar Base,Modified 250 用于空腸彎曲菌的分離培養(SN 、GB標準)
改良MSRV培養基 MSRV Medium，Modified 250 用于沙門氏的分離培養(MERCK方法)
Kovacs氏靛基質試劑盒 10ml*1 吲哚（靛基質）試驗配套試劑
