【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人紅白血病細胞；Kasumi-1培養
形態特性 原粒細胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 這是一個帶有8：21號染色體轉位的白血病細胞株。 這個轉位使得AML1基因和ETO (或稱 MTG8)基因串聯，使融合基因AML1-ETO (也稱作 AML1-MTG或 RUNX1-CBF2T1)的表達升高，因而細胞產生嵌合的AML1-ETO蛋白。 這個蛋白下調CEBPA mRNA，蛋白和DNA的結合活性，而這種結合對粒性白細胞的分化是重要的。 這株細胞建立于一位急性白血病患者的外周血。 這株細胞髓過氧化物酶陽性，顯示其髓性成熟的形態。 增生試驗顯示，培養的細胞對IL-3、IL-6、G-CSF（粒細胞
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清，20%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
嗜鹽菌選擇性瓊脂 250(g)
溴甲酚紫葡萄糖肉湯 250(g)
酸性肉湯 250(g)
明膠培養基基礎 250(g)
綠膿菌素測定培養基 250(g)
乳糖膽鹽培養基 250(g)
乳糖膽鹽培養基 1000(g)
HC瓊脂基礎 250
改良LETHEEN瓊脂基礎 250(g)
TAT肉湯基礎 250(g)
真菌培養基 250(g)
酵母浸出粉胨葡萄糖培養基（YPD） 250(g)
抗生素檢定培養基1號（pH 7.9±0.1） 250(g) ALR 肝再生增強因子抗體
pAMSH 信號轉導銜接結合蛋白抗體
ASB3 錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體
Aurora C 有絲分裂激酶B抗體
Phospho-Ack1 (Tyr284) 磷酸化Ack1抗體
Phospho-Ack1 (Tyr326) 磷酸化Ack1抗體
Phospho-beta-Arrestin 1 (Ser412) 磷酸化β抑制蛋白1抗體
Phospho-Aurora A (Thr288) 磷酸化有絲分裂激酶A抗體
phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗體
Aurora A 有絲分裂激酶A抗體
AXL 粘附相關激酶抗體
phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703) 磷酸化粘附相關激酶抗體
phospho-AKT1 + AKT2 + AKT3 (Thr308+Thr309+Thr305) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-AQP2(Ser269) 磷酸化水通道蛋白2抗體
phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
phospho-AKT1(Ser129) 磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-Amyloid Precursor Protein (Ser198) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
