人膀胱移行細胞癌；J82復蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室，可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
| 產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
| 人膀胱移行細胞癌；J82復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3－5天 |
細胞名稱
形態特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 電子顯微鏡下未觀察到橋粒但觀察到數目不同的粗面內質網和突出微絲。 含ras (H-ras)癌基因。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優質胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(54+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。
AKIP 極光激酶A相互作用蛋白1抗體
APOL6 載脂蛋白樣蛋白6抗體
ARTS 凋亡相關蛋白TGFb信號抗體
A2LD1 A2LD1蛋白抗體
A4GNT α1,4-N-乙酰葡糖胺轉移酶α4Gn-T抗體
AADAC 芳香乙酰胺脫乙酰基酶抗體
AADACL4 芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白4抗體
AASDHPPT 氨基乙二酸半醛脫氫酶磷酸泛酰巰基乙胺轉移酶抗體
AASS 賴氨酸酮戊二酸還原酶抗體
ANKRD6 錨蛋白重復域6抗體
Arginase II *酶2抗體
AKR1C3 醛固酮還原酶家族1成員C3抗體
ACTHR 促腎上腺皮質激素受體
AGRP 褐黑素相關蛋白ART抗體
Adrenodoxin 腎上腺皮質線粒體鐵氧還蛋白抗體
Adracalin Allgrove綜合征相關蛋白抗體
AAV5 capsid protein VP1 腺相關病毒5 VP1抗體
ALDH3A2 脂肪醛脫氫酶抗體
AVPR1A 抗利尿激素1A抗體
AVPR1B 抗利尿激素受體1B抗體Meat liver agar 肉肝瓊脂 1.15045.0500 MERCK默克
m EC-broth with Nocobiocin mEC肉湯（含新生霉素） 1.14582.0500 MERCK默克
Agar MFC Mfc 瓊脂 1.11278.0500 MERCK默克
Enterobacteriac enrichment broth acc.to MOSSEL腸桿菌富集肉湯 1.05394.0500 MERCK默克
MRS agar Lactobacillus agar acc.to DEMAN,ROGOSA and SHARPE MRS 1.10660.0500 MERCK默克
瓊脂/乳酸菌瓊脂
MRS agar Lactobacillus broth acc.to DEMAN,ROGOSA and SHARPE MRS 1.10661.0500 MERCK默克
瓊脂/乳酸菌瓊脂
MR-VP broth Methylred-VOGES-PROSKAUER broth MR-VP肉湯/甲基紅 VOGES-PROSKAUER肉湯 1.05712.0500 MERCK默克
MSRV selective supplement MSRV 選擇添加劑 1.09874.0001 MERCK默克
MSRV medium( base) modified MSRV改性培養基（基礎） 1.09878.0500 MERCK默克
MUELLER-HINTON agar MUELLER-HINTON 瓊脂 1.05437.0500 MERCK默克
MUELLER-HINTON agar .to NCCLS MUELLER-HINTON瓊脂 1.05435.0500 MERCK默克
MUELLER-HINTON broth MUELLER-HINTON 肉湯 1.10293.0500 MERCK默克
Nutrient agar營養瓊脂 1.05450.0500 MERCK默克
Nutrient broth 營養瓊脂 1.05443.0500 MERCK默克
