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人神經母細胞瘤細胞;SK-N-SH特性

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所  在  地上海

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更新時間:2017-01-23 10:02:10瀏覽次數:264次

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產品簡介

人神經母細胞瘤細胞;SK-N-SH特性,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

產品名稱生長特性發貨地貨期
人神經母細胞瘤細胞;SK-N-SH特性貼壁生長上海3-5天

細胞名稱  人神經母細胞瘤細胞;SK-N-SH特性
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞是由Biedler JL建立的兩株神經組織來源的細胞中的一株(另一株是SK-N-MC)。與SK-N-MC不同,該細胞倍增時間更長,表達更高水平的多巴胺-β-羥化酶;常作為細胞介導的細胞毒性分析的靶細胞。 
培養條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  C7
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR   STR鑒定
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
AAdenylosuccinate Lyase    腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體
A1BG    α1B糖蛋白抗體
A1CF    載脂蛋白B-mRNA編碼蛋白抗體
AIFM3    凋亡誘導因子3抗體
Apaf1 Interacting Protein    凋亡蛋白活因子1相互作用蛋白抗體
APPD    凋亡誘導蛋白D抗體
Acid sphingomyelinase    酸神經鞘磷脂酶抗體
ANT-1    腺嘌呤核苷酸轉運蛋白1抗體
ALS2CR8    肌側索硬化2染色體區域候選蛋白8抗體
ATP6IP2    ATP酶H+轉運溶酶體輔助蛋白2抗體
Azurocidin    肝素結合蛋白/陽離子抗菌蛋白37/天青殺素抗體
Alpha-Synuclein    核突觸蛋白抗體
beta-Actin (Loading Control)    β-肌動蛋白/β-Actin 抗體(內參抗體)
beta-Amyloid 1-42 (CT)    β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體        12100-061    1*10L        
DMEM(高糖),干粉    "含4500mg/l葡萄糖,L-*
110mg/l丙酮酸鈉,不含*"    12800-017    10*1L        
        12800-082    1*10L        
優級胎牛血清     的FBS產品。高品質,高價值,適于各種一般的應用     "澳洲
 "    10099-133    100ml     
            10099-141    500ml     
ES級別胎牛血清    經過ES細胞的培養測試,讓您培養ES細胞時無需再預實驗試批號    新西蘭    30044-333    500ml    
新生牛血清    采集自出生20天內的新生牛    新西蘭    16010-159    500ml    
            16010-142    1000ml    
馬血清    供體動物的EIA檢測呈陰性    新西蘭    16050-130    100ml    
            16050-122    500ml    
熱滅活馬血清    供體動物的EIA檢測呈陰性56°下加熱30分鐘進行熱滅活     新西蘭    26050-070    100ml    
            26050-088    500ml    
山羊血清    采集自供體動物     新西蘭     16210-064    100ml    
            16210-072    500ml    
念珠菌顯色培養基    用于分離和鑒定主要致病性念珠菌    1000ml            

 

 


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