【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肝癌細胞；HCC-LY5使用說明書
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
* 3mg/支*5 每支添加于 100ml HB4155
糖發酵基礎肉湯 250 適用于微生物檢驗中各種糖發酵實驗，無菌加入各種糖醇類物質（SN標準）
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎 250 用于李氏菌的增菌培養(MercK標準)
綠膿菌素測定培養基(PDP) 250 用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗（GB標準）
乳糖膽鹽培養基 250 用于化妝品中糞大腸菌群的測定（GB標準）
TTC*-吐溫80-營養瓊脂 250 用于化妝品中細菌總數測定（GB標準）
HC瓊脂基礎 250 用于化妝品中霉菌總數測定(Acumedia 方法)
改良LETHEEN瓊脂基礎 250 用于化妝品中微生物檢測(Acumedia 方法)
液體硫乙醇酸鹽培養基（不含瓊脂） 250 用于混濁制品需氧菌無菌試驗（GB標準）
YPD瓊脂 250 用于測定酵母菌總數（GB標準）
抗生素檢定培養基1號（高PH） 250 用于*，*，*，*等效價測定
抗生素檢定培養基1號（低PH） 250 用于磺芐*效價測定
抗生素檢定培養基2號（高PH） 250 用于*，*等效價測定
玫瑰紅鈉瓊脂 250 用于霉菌、酵母菌計數
普通瓊脂斜面培養基(PH8.0-8.2) 250 分離培養霍亂弧菌，*檢定用
*高鹽瓊脂 250 用于*的選擇性分離培養
抗生素檢定培養基4號 250 用于*等的效價測定
抗生素檢定培養基6號 250 用于粘菌素等的效價測定
抗生素檢定培養基7號 250 用于*鈉等的效價測定
抗生素檢定培養基8號 250 用于去甲*等的效價測定
抗生素5號 250 用于*檢定菌種培養 LSTN2 老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS2抗體
CPEB3 細胞質多聚腺苷酸結合蛋白3抗體
CPLX1 Complexin I/復合素1抗體
CPLX2 Complexin II/復合素2抗體
CEBP gamma 轉錄調節因子C/EBPγ抗體
CLIP2 細胞質連接蛋白2抗體
CD20 CD20抗體
C12ORF40 12號染色體開放閱讀框40抗體
C12ORF42 12號染色體開放閱讀框42抗體
C11ORF46 11號染色體開放閱讀框46抗體
C11ORF67 11號染色體開放閱讀框67抗體
CHRNA7 煙堿型乙酰*受體α7抗體
CLNS1A 氯離子通道調節蛋白1A抗體
MUC1 粘蛋白-1/上皮膜抗原抗體
CWF19L1 CWF19L1蛋白抗體
