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人肝癌細胞;HCC-LY10復蘇

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-23 12:18:03瀏覽次數:114次

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產品簡介

人肝癌細胞;HCC-LY10復蘇細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

人肝癌細胞;HCC-LY10復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  人肝癌細胞;HCC-LY10復蘇
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C2
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

產品名稱生長特性發貨地貨期
貼壁生長上海3-5天

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
C2orf43    2號染色體開放閱讀框43抗體
Classical swine fever virus    豬瘟病毒抗體
CP110    中心體蛋白110抗體
Cellulase    纖維素酶
CDC14B    細胞分裂周期蛋白14B抗體
C1orf177    1號染色體開放閱讀框177抗體
C1orf183    1號染色體開放閱讀框183抗體
Clenbuterol    克侖特羅/瘦肉精抗體
C6orf151    6號染色體開放閱讀框151抗體
C15orf52    15號染色體開放閱讀框52抗體
C2orf89    2號染色體開放閱讀框89抗體
CARD10    BCL10結合蛋白和激活核轉錄因子抗體
CARD15    凋亡加強結構域蛋白15抗體胰膘肉湯基礎        100    用于肺炎鏈球菌、布魯氏菌屬細菌的培養            
豆粉瓊脂(血瓊脂基礎)      250    用于配制血瓊脂、巧克力瓊脂及亞碲酸鹽瓊脂            
細菌L型增菌液    65    用于L型細菌增菌培養            
細菌L型分離瓊脂    110    用于L型細菌分離培養            
溶血瓊脂基礎    250    用于鼠疫桿菌培養            
龍膽紫血液瓊脂基礎    250    用于鼠疫桿菌的選擇性培養            
改良羅氏培養基基礎        250    用于結核桿菌的培養、計數、保存、照光試驗、藥物敏感性測定及菌型鑒定等            
酸性L-G培養基基礎    250    適用于堿性物質處理的結核桿菌標本            
堿性L-G培養基基礎    250    適用于酸性物質處理的結核桿菌標本            
PNB(對硝基苯甲酸)    1    加入改良羅氏培養基中制成PNB培養基,用于分枝桿菌菌型鑒定            
TCH(噻吩-2-羧酸酰肼)    0.1    加入改良羅氏培養基中制成TCH培養基,用于分枝桿菌鑒定            
戊烷脒*瓊脂基礎    250    用于炭疽桿菌的培養及初步鑒定            
 

 


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