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人胰腺導管腺癌細胞;CFPAC-1復蘇

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-23 13:31:17瀏覽次數:215次

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產品簡介

人胰腺導管腺癌細胞;CFPAC-1復蘇細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

人胰腺導管腺癌細胞;CFPAC-1復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

產品名稱生長特性發貨地貨期
人胰腺導管腺癌細胞;CFPAC-1復蘇貼壁生長上海3-5天

細胞名稱  
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞系來自于一位囊性纖維化病人的導管腺癌(肝轉移)細胞,表達CA19-9 抗原。 
培養條件   IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  PN5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR   AMEL:X,Y;CSF1PO:10,10;D12S391:17,17;D13S317:12,12;D16S539:9,11;D18S51:12,12;D19S433:13,15;D21S11:30,31.2;D2S1338:18,23;D2S441:10,14;D3S1358:16,16;D5S818:10,11;D6S1043:20,20;D7S820:8,10;D8S1179:11,15;FGA:21,22;Penta D:11,13;Penta E:10,12;TH01:8,8;TPOX:8,8;
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
CCR-2    細胞表面趨化因子受體2抗體
CCR3    細胞表面趨化因子受體3抗體
CCR4    細胞表面趨化因子受體4抗體
Caspase-3    活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體
Collagen VI alpha 1    抗Ⅵ型膠原抗體
Caspase 8    半*蛋白酶8抗體
COPS8    信號轉導蛋白亞基8抗體
CCR10    細胞表面趨化因子受體10抗體
Transferrin receptor    轉鐵蛋白受體抗體
CNR-2    鈣粘蛋白相關的神經受體2抗體
CHK1    細胞周期檢測點激酶1抗體
CNR1    鈣粘蛋白相關的神經受體1抗體
CDX2+3    尾側型同源轉錄因子2/3抗體
Cyclin H    周期素H抗體
C6orf15    6號染色體開放閱讀框15抗體
CD95    載脂蛋白A1抗體BCYE 瓊脂(Legionella 瓊脂)    250    用于軍團菌的選擇性分離培養(OXOID方法)            
發酵蛋白胨                               250                
其它菌檢測培養基                    
BIGGY 瓊脂    250    用于念球菌的分離培養和計數(OXOID方法)            
C.L.E.D 培養基    250    用于尿液中微生物的選擇性分離培養(OXOID方法)            
C.L.E.D 培養基添加劑    1ml*5支    每支加入100ml C.L.E.D 培養基中            
GC瓊脂    250    用于淋球菌的分離培養(OXOID方法)            
BLB培養基    250    用于雙歧桿菌的分離培養            
PEA 瓊脂    250g    用于從含革蘭氏陰性菌的標本中分離培養革蘭氏陽性菌            
乙基紫疊氮鈉肉湯      250    用于腸道菌的選擇性增菌培養(Alpha Biosciences方法)            
艾格瓊脂    250    用于過程中無菌監測(Acumedia方法)            
NTM 培養基    250    用于淋球菌的分離培養(Quelab方法)            

 

 

 


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