【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肺鱗狀癌細胞；NCI-H226使用說明書
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR AMEL:X,Y；CSF1PO:10,11；D12S391:22,22；D13S317:13,14；D16S539:9,12；D18S51:16,16；D19S433:15,15；D21S11:29,32.2；D2S1338:25,25；D2S441:14,14；D3S1358:16,16；D5S818:11,12；D6S1043:13,18；D7S820:8,10；D8S1179:14,15；FGA:20,23；Penta D:9,10；Penta E:12,15；TH01:8,9.3；TPOX:8,1
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
類桿菌-膽汁-七葉甙（BBE）瓊脂 250 用于脆弱擬桿菌群的分離培養
TM培養基 250 用于淋球菌的分離培養(Quelab方法)
YNB 培養基 100 用于基因工程中酵母菌的發酵培養
原材料系列
胰蛋白胨 250 培養基原材料，提供細菌生長氮源，含*
酪蛋白胨 250 干酪素*水解而成，培養基原材料
牛肉浸粉 250 培養基原材料，提供細菌生長所需的生長因子
酵母浸粉 250 培養基原材料，提供細菌生長所需的*族
細菌瓊脂粉 250 培養基原材料，培養基凝固劑
植物（大豆）蛋白胨 200 培養基原材料，含碳水化合物，提供細菌生長氮源
細菌蛋白胨 250 培養基原材料，提供細菌生長所需的生長因子
月示胨 250 培養基原材料，為營養要求高的細菌生長提供營養
三號膽鹽 100 用于抑制革蘭氏陽性菌的生長
牛心浸粉 100 培養基原材料，提供豐富的營養成份
肝浸粉 100 培養基原材料，為營養要求高的細菌提供生長營養成份
牛膽鹽 100 用于抑制革蘭氏陽性菌的生長 C22orf39 22號染色體開放閱讀框39抗體
Cyclin G 周期素G抗體
Crk p38 Crk p38抗體
phospho-Crk p38 (Tyr221) 磷酸化Crk p38抗體
RUNX2 核心結合因子α1抗體(成骨特異轉錄因子)Cbfα1
CCK8 膽囊收縮素8抗體
CCR-1 細胞表面趨化因子受體1抗體
CDKN2A/p14ARF 抑癌基因p14抗體
CDKN2A/p16-INK4a 抑癌基因p16抗體
CDKN1B P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑
C9orf171 9號染色體開放閱讀框171抗體
C20orf177 20號染色體開放閱讀框177抗體
