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上海撫生實業有限公司
人舌鱗狀癌細胞;CAL 27使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人舌鱗狀癌細胞;CAL 27使用說明書
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系于1982年建立,從一位56歲白種男性的病變舌中間部分取得,該細胞具高密度顆粒狀胞漿。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR AMEL:X,X;CSF1PO:10,12;D12S391:18.3,20;D13S317:10,11;D16S539:11,12;D18S51:13,13;D19S433:14,15.2;D21S11:28,29;D2S1338:23,24;D2S441:10,11.3;D3S1358:16,16;D5S818:11,12;D6S1043:12,12;D7S820:10,10;D8S1179:13,15;FGA:25,25;Penta D:9,10;Penta E:7,7;TH01:6,9.3;TPOX
同工酶
染色體
使用權限 A類
產品名稱 | 人舌鱗狀癌細胞;CAL 27使用說明書 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
四號瓊脂基礎 250 用于霍亂弧菌的選擇性分離,后加亞碲酸鉀
大腸菌群顯色培養基 CRM001 10000ml 大腸菌群顯色培養基用于大腸菌群的快速檢測和計數
科瑪嘉弧菌顯色培養基 M0309-1 1000ml/瓶 用于霍亂弧菌,副溶血弧菌的分離和初步鑒別
科瑪嘉李斯特氏菌顯色培養基 M0308-1 1000ml/瓶
麥芽浸膏湯 27130 250g 用于酵母和霉菌的培養,還用于酸性罐頭食品商業無菌檢驗(GB/T4789.26-2003)。
麥芽汁培養基 21120 250g 用于酵母菌的增菌培養
麥芽汁瓊脂培養基 21110 250g 供酵母菌的培養、鑒定及保存菌種用。
1%聚山梨酯80-玉米瓊脂培養基 21105 100g 用于白色念珠菌芽管試驗的培養
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基(YPD) 21100 250g 用于酵母菌的培養,及供藥品和生物制品中含王漿和蜂蜜的合劑酵母菌數測定用。
沙氏葡萄糖瓊脂培養基 21098 250g 用于白色念珠菌的培養。
沙氏* 21095 250g 沙氏葡萄糖液體培養基用于白色念珠菌的培養。 CD244 CD244抗體
phospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 磷酸化鈣/鈣調素依賴蛋白激酶2α抗體
Phospho-Caspase-9 (Thr125) 磷酸化半*蛋白酶9抗體
Phospho-Caspase-9 (Tyr153) 磷酸化半*蛋白酶9抗體
Phospho-Beta-Catenin (Ser33 + 37) 磷酸化β 連環素蛋白抗體
Phospho-Beta Catenin (Ser45) 磷酸化β 連環素蛋白抗體
Phospho-Beta-Catenin (Ser552) 磷酸化β 連環素蛋白抗體
Phospho-Beta Catenin (Ser675) 磷酸化β 連環素蛋白抗體
Claudin 1 緊密連接蛋白1抗體(C端)
CEBP-alpha 轉錄調節因子C/EBP α 抗體
CT054 核黃素轉運蛋白2抗體
phospho-Caldesmon (Ser789) 磷酸化鈣介質素抗體
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