【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人結直腸腺癌細胞；DLD-1培養
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞適于做轉染宿主
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR AMEL:X,Y；CSF1PO:11,12；D12S391:19,22；D13S317:8,11；D16S539:12,13；D18S51:11,17；D19S433:14,16；D21S11:29,32.2；D2S1338:17,25；D2S441:13,15；D3S1358:17,17；D5S818:13,13；D6S1043:11,13；D7S820:10,12；D8S1179:15,15；FGA:22,22；Penta D:9,14；Penta E:7,14；TH01:7,9.3；TPOX:8,1
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
MUG營養瓊脂培養基 28267 100g 用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的大腸埃希氏菌(GB/T5750.12-2006)。
EC-MUG培養基 28266 100g 用于多管發酵法測定生活飲用水及其水源水中的大腸埃希氏菌（GB/T5750.12-2006)。
4-甲基傘形酮葡糖苷酸(MUG)培養基 28265 100g 用于大腸埃希氏桿菌快速檢測。(《中華人民共和國藥典》2010年版)
Koser氏枸櫞酸鹽肉湯 22121 100g 用于細菌的枸櫞酸鹽的試驗。(SN 0196-92和GB/T4789.38-2008)
EC肉湯 22230 250g 用于多管發酵法測定糞大腸菌群和大腸桿菌的確證試驗(GB/T4789.38－2008，GB/T 4789.39-2008和SN0...
結晶紫中性紅膽鹽MUG瓊脂(VRBA-MUG) 22225 100g 用于食品中大腸桿菌的平板計數。（GB/T 4789.38-2008）
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA) 22221 250g 用于水或食品中大腸菌群平板菌落計數(GB 4789.3-2010和SN0169-92)。
煌綠乳糖膽鹽肉湯BGLB 22220 250g 用于多管發酵法測定大腸菌群的確證試驗(GB 4789.3-2010和SN0169-92)。
月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST) 22210 250g 用于多管發酵法測定大腸菌群和糞大腸菌群(GB 4789.3-2010，GB/T 4789.38-2008，GB/T 4789.39-200...
乳糖蛋白胨培養液 22200 250g 用于水中多管發酵法或濾膜法測定大腸菌群(GB/T5750.12-2006和GB/T8538-2008)。
亮綠乳糖培養液（BGB） 22190 250g 用于多管發酵法測定飲用礦泉水中大腸菌群的確證試驗(GB/T8538-2008)。 C7orf26 7號染色體開放閱讀框26抗體
CD55 衰變加速因子CD55抗體
CD59 CD59抗體
CRIPTO 畸胎瘤衍化生長因子抗體(N端)
Calpain 14 鈣激活蛋白酶14抗體
CK18 細胞角蛋白18抗體（C端）
Collagen VII 7型膠原抗體
Phospho-Beta Catenin (Thr41 + Ser45) 磷酸化β 連環素蛋白抗體
CBL2 原癌蛋白CBL2抗體
Cecropin 殺菌肽/天蠶抗菌肽單克隆抗體
C17orf87 第十七號染色體開放閱讀框87抗體
Calcitonin receptor 降鈣素受體抗體
C2a 補體C2a鏈多肽抗體
