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慢性粒細胞白血病細胞;K-562復蘇

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更新時間:2017-01-23 13:39:14瀏覽次數:255次

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產品簡介

慢性粒細胞白血病細胞;K-562復蘇細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

慢性粒細胞白血病細胞;K-562復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  慢性粒細胞白血病細胞;K-562復蘇
形態特性   成淋巴細胞
生長特性  懸浮生長
特征特性   該細胞適合做轉染宿主,來自于一位53歲女性慢性粒細胞白血病人的胸腔積液 
培養條件   IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  PN5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR   AMEL:X,X;CSF1PO:9,10;D12S391:23,23;D13S317:8,8;D16S539:11,12;D18S51:15,16;D19S433:14,14.2;D21S11:29,31;D2S1338:17,17;D2S441:10,14;D3S1358:15,15;D5S818:11,12;D6S1043:11,11;D7S820:9,11;D8S1179:12,12;FGA:21,24;Penta D:9,13;Penta E:5,14;TH01:9.3,9.3;TPOX:8,9;
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

產品名稱生長特性發貨地貨期
貼壁生長上海3-5天

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
頭孢磺啶(MUGal肉湯凍干配套試劑)     SR0010     0.5mg/支x10     每支添加于100ml(022051)中配成MUGal肉湯。    
MFC培養基    28950     250g     用于水中糞大腸菌群的濾膜法測定(GB/T5057.12-2006)。    
膽鹽乳糖培養基(BL)    22170     250g     用于藥品中大腸桿菌和綠膿桿菌的增菌培養。    
腸道菌增菌肉湯    22160     250g     用于腸道菌的增菌培養    
品紅亞硫酸鈉培養基(遠藤瓊脂培養基)    22150     250g     用于水中大腸菌群的分離或確證試驗。    
麥康凱瓊脂培養基(藥典)    22142     250g     供分離發酵乳糖的革蘭氏陰性腸道桿菌。    
曙紅*瓊脂培養基(EMB)    22141     250g     用于藥品中大腸桿菌、沙門氏菌檢測。    
麥康凱瓊脂培養基    22140     250g     供分離發酵乳糖的革蘭氏陰性腸道桿菌    
改良伊紅美藍瓊脂    22062     250g     用于革蘭氏陰性腸道菌的分離和培養。    
伊紅美藍瓊脂(EMB)    22060     250g     用于分離革蘭氏陰性腸道菌特別是大腸菌群和糞大腸菌群    
Aliz-gal瓊脂    22052     100g     用于大腸菌群平板計數的快速檢測    
MUGal(4-甲基傘形酮-β-半乳萄糖苷)肉湯    22051     100g     用于多管發酵法快速檢測大腸菌群    
乳糖發酵培養基    22050     250g     用于多管發酵法測定食品、純凈水和一次性使用衛生用品中大腸菌群的確證試驗    CD80    CD80抗體
CD19    CD19抗體
CCL26    C-C元件趨化因子26抗體
C5orf22    5號染色體開放閱讀框22抗體
CLCA4    鈣激活氯離子通道4蛋白抗體
CCL26 Signal peptide    嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體
CCL26    嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體
chemerin    趨化素抗體
C5orf55     5號染色體開放閱讀框55抗體
CXCR7    細胞表面趨化因子受體7抗體
COX7A2    *氧化酶7A2抗體
CD36    CD36抗體
CYP11B2    醛固酮合成酶CYP11B2抗體
C7orf16    7號染色體開放閱讀框16抗體
C10orf62    10號染色體開放閱讀框62抗體

 

 


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