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上海撫生實業有限公司
慢性粒細胞白血病細胞;K-562復蘇細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
慢性粒細胞白血病細胞;K-562復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞名稱 慢性粒細胞白血病細胞;K-562復蘇
形態特性 成淋巴細胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞適合做轉染宿主,來自于一位53歲女性慢性粒細胞白血病人的胸腔積液
培養條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 PN5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR AMEL:X,X;CSF1PO:9,10;D12S391:23,23;D13S317:8,8;D16S539:11,12;D18S51:15,16;D19S433:14,14.2;D21S11:29,31;D2S1338:17,17;D2S441:10,14;D3S1358:15,15;D5S818:11,12;D6S1043:11,11;D7S820:9,11;D8S1179:12,12;FGA:21,24;Penta D:9,13;Penta E:5,14;TH01:9.3,9.3;TPOX:8,9;
同工酶
染色體
使用權限 A類
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
頭孢磺啶(MUGal肉湯凍干配套試劑) SR0010 0.5mg/支x10 每支添加于100ml(022051)中配成MUGal肉湯。
MFC培養基 28950 250g 用于水中糞大腸菌群的濾膜法測定(GB/T5057.12-2006)。
膽鹽乳糖培養基(BL) 22170 250g 用于藥品中大腸桿菌和綠膿桿菌的增菌培養。
腸道菌增菌肉湯 22160 250g 用于腸道菌的增菌培養
品紅亞硫酸鈉培養基(遠藤瓊脂培養基) 22150 250g 用于水中大腸菌群的分離或確證試驗。
麥康凱瓊脂培養基(藥典) 22142 250g 供分離發酵乳糖的革蘭氏陰性腸道桿菌。
曙紅*瓊脂培養基(EMB) 22141 250g 用于藥品中大腸桿菌、沙門氏菌檢測。
麥康凱瓊脂培養基 22140 250g 供分離發酵乳糖的革蘭氏陰性腸道桿菌
改良伊紅美藍瓊脂 22062 250g 用于革蘭氏陰性腸道菌的分離和培養。
伊紅美藍瓊脂(EMB) 22060 250g 用于分離革蘭氏陰性腸道菌特別是大腸菌群和糞大腸菌群
Aliz-gal瓊脂 22052 100g 用于大腸菌群平板計數的快速檢測
MUGal(4-甲基傘形酮-β-半乳萄糖苷)肉湯 22051 100g 用于多管發酵法快速檢測大腸菌群
乳糖發酵培養基 22050 250g 用于多管發酵法測定食品、純凈水和一次性使用衛生用品中大腸菌群的確證試驗 CD80 CD80抗體
CD19 CD19抗體
CCL26 C-C元件趨化因子26抗體
C5orf22 5號染色體開放閱讀框22抗體
CLCA4 鈣激活氯離子通道4蛋白抗體
CCL26 Signal peptide 嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體
CCL26 嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體
chemerin 趨化素抗體
C5orf55 5號染色體開放閱讀框55抗體
CXCR7 細胞表面趨化因子受體7抗體
COX7A2 *氧化酶7A2抗體
CD36 CD36抗體
CYP11B2 醛固酮合成酶CYP11B2抗體
C7orf16 7號染色體開放閱讀框16抗體
C10orf62 10號染色體開放閱讀框62抗體
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