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人源性腎透明細胞癌細胞舒尼替尼耐藥株；ACSu培養(yǎng)

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更新時間：2017-01-23 13:46:52瀏覽次數(shù)：238次

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產(chǎn)品簡介

人源性腎透明細胞癌細胞舒尼替尼耐藥株；ACSu培養(yǎng)，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細介紹

產(chǎn)品名稱	人源性腎透明細胞癌細胞舒尼替尼耐藥株；ACSu培養(yǎng)
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

細胞名稱 人源性腎透明細胞癌細胞舒尼替尼耐藥株；ACSu培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限未定

復(fù)蘇操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
鹽增菌液(SF)   23050   250g   用于沙門氏菌特別是傷*的選擇性分離培養(yǎng)(GB 4789.4－2010，SN/T2206.1-2008和SN0170-92...
牛津瓊脂基礎(chǔ)   26060   100g   用于單核增生李斯特氏菌的選擇性分離(SN0184-2005)。
半固體瓊脂   26050   250g   供細菌動力觀察、菌種保存等用(GB 4789.4－2010和GB/T4789.8－2008)。
金氏B培養(yǎng)基   27052   250g   用于飲用天然礦泉水中銅綠假單胞菌產(chǎn)熒光特性的測定。（GB/T 8538-2008）
綠膿菌素測定用培養(yǎng)基PDP（藥典）   27051   250g   用于鑒別綠膿桿菌產(chǎn)生綠膿菌素試驗。(《中華人民共和國藥典》2010年版)
綠膿菌素測定用培養(yǎng)基（PDP）   27050   250g   用于鑒別綠膿桿菌產(chǎn)生綠膿菌素試驗(GB15979-2002，(化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗方法2007版)。
溴化十六烷基*銨瓊脂培養(yǎng)基   27041   250g   用于綠膿桿菌及其它革蘭氏陰性非發(fā)酵菌的選擇性分離培養(yǎng)。(《中華人民共和國藥典》2010年版)
十六烷*基*培養(yǎng)基   27040   100g   用于綠膿桿菌及其它革蘭氏陰性非發(fā)酵菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB15979-2002，化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗...
乙酰胺培養(yǎng)基   27030   100g   用于革蘭氏陰性非發(fā)酵菌特別是綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)(化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗方法2007版)。
明膠培養(yǎng)基(營養(yǎng)明膠)   22250   100g   供測定細菌液化明膠使用(GB15979-2002和GB/T4789.28－2003 中3.10，GB/T4789.35－2003)。
明膠培養(yǎng)基(營養(yǎng)明膠)   22250   100g   供測定細菌液化明膠使用(GB15979-2002和GB/T4789.28－2003 中3.10，GB/T4789.35－2003)。   C1orf129   1號染色體開放閱讀框129抗體
CHIP   E3泛素蛋白連接酶CHIP蛋白抗體
CRAT   肉毒堿O-乙酰基轉(zhuǎn)移酶
C5orf45   5號染色體開放閱讀框45抗體
C5orf48    5號染色體開放閱讀框48抗體
C6orf136   6號染色體開放閱讀框136抗體
C6orf138   6號染色體開放閱讀框138抗體
C6orf145   6號染色體開放閱讀框145抗體
CD39   CD39抗體
CC5orf49   5號染色體開放閱讀框49抗體
C5orf35   5號染色體開放閱讀框35抗體