【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 表達HLA-G5的K562細胞；K562-HLA-G5使用說明書
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
CTNNBIP1 β鏈接素相互作用蛋白1抗體
phospho-CTNNBIP1 (Thr43+Ser50) 磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體
phospho-Beta catenin (Tyr86) 磷酸化β 連環素蛋白抗體
Chloroplast protease 葉綠體蛋白酶抗體（植物）
phospho-CDC27 (Ser427) 磷酸化后期促進復合蛋白3抗體
Phospho-Cofilin (Tyr140) 磷酸化絲切蛋白抗體
phospho-CFL1 (Tyr89) 磷酸化絲切蛋白抗體
Phospho-CHK2 (ser33) 磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體
Phospho-cdc25A (Ser178) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體
Phospho-cdc25A (Ser293) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25抗體
CDC27 后期促進復合蛋白3抗體
phospho-CRK (Ser41) 磷酸化CRK抗體
K Cadherin 鈣粘蛋白6抗體aji，人Burkitt's淋巴瘤細胞
Saos-2，人成骨肉瘤細胞
Caco-2，人結直腸腺癌細胞
NCI-N87 [N87]人胃癌細胞
MGC80-3（MGC-803）人胃癌細胞
EC109，人食管癌細胞
HGC-27人胃癌細胞
AGS人胃腺癌細胞
U251人膠質瘤細胞
THP-1人單核白血病細胞
HuH-7人肝癌細胞
