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人神經母細胞瘤;SH-SY5Y特性

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更新時間:2017-01-23 14:38:41瀏覽次數:831次

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產品簡介

人神經母細胞瘤;SH-SY5Y特性,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

人神經母細胞瘤;SH-SY5Y特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  人神經母細胞瘤;SH-SY5Y特性
形態特性   上皮樣細胞
生長特性  貼壁懸浮混合生長
特征特性   該細胞系來源于1970年建立的一神經母細胞瘤患者的轉移骨瘤灶細胞SK-N-SH經三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。 該細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。 SH-SY5Y細胞的生長密度可高達1X106細胞/cm2,生長成懸浮和貼壁混合生長,有的聚集成細胞叢 
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代;3-4天一次
傳代情況  PN8
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  熒光法(-)
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:11;D16S539:8,13;D18S51:13,16;D19S433:13,14;D21S11:31,31.2;D2S1338:17,19;D3S1358:15,16;D5S818:7,12;D7S820:7,10;D8S1179:10,15;FGA:23.2,24;TH01:7,10;THOX:8,11;vWA:14,18;
同工酶  無
染色體   46-48
使用權限  A類

產品名稱生長特性發貨地貨期
貼壁生長上海3-5天

細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
C6orf226     6號染色體開放閱讀框226抗體
connexin 30    間隙連接蛋白30抗體
C2orf69    2號染色體開放閱讀框69抗體
C3orf18    3號染色體開放閱讀框18抗體
CCL4    巨噬細胞炎癥因子1β /MIP-1β抗體
CD147    細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子抗體
CD11b    整合素αM/巨噬細胞表面分子抗體
CD31    血小板內皮細胞黏附分子-1抗體
CD31    血小板內皮細胞黏附分子1抗體
CD34    CD34抗體
CD36    CD36抗體
CARD6    凋亡加強結構域蛋白6抗體
CARD17    凋亡加強結構域蛋白17抗體CM-H125    人腦成纖維細胞*培養基    100mL
CM-H126    人小腦顆粒細胞*培養基    100mL
CM-H127    人晶狀體上皮細胞*培養基    100mL
CM-H128    人角膜上皮細胞*培養基    100mL
CM-H129    人視網膜色素上皮細胞*培養基    100mL
CM-H130    人視網膜微血管內皮細胞*培養基    100mL
CM-H131    人角膜成纖維細胞*培養基    100mL
CM-H132    人小梁網細胞*培養基    100mL
CM-H133    人視網膜muller細胞*培養基    100mL
CM-H134    人角膜內皮細胞*培養基    100mL
CM-H135    人脈絡膜微血管細胞*培養基    100mL
CM-H136    人牙周膜成纖維細胞*培養基    100mL
CM-R001    大鼠肺微血管內皮細胞*培養基    100mL

 

 

 


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