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小鼠腎集合管細胞（SV40轉(zhuǎn)化）；M-1特性

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更新時間：2017-01-24 09:38:46瀏覽次數(shù)：158次

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產(chǎn)品簡介

小鼠腎集合管細胞（SV40轉(zhuǎn)化）；M-1特性，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細介紹

小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1特性來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。

細胞名稱 小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1特性
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性貼壁生長
特征特性   該細胞源于tg(SV40E)Bri7轉(zhuǎn)基因小鼠的正常腎組織，含SV40病毒的DNA序列，保留了皮質(zhì)集合管的某些特性，如形態(tài)和CCD（皮質(zhì)結(jié)合管）抗原。大多M-1細胞的克隆具有皮質(zhì)集合管中閏細胞或主細胞的特征；5%~10%的細胞有閏細胞和主細胞的雙重表型。當(dāng)該細胞在滲透性支持物上生長時，可形成具有負跨膜電位差的腔樣結(jié)構(gòu)。
培養(yǎng)條件   DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  10%FBS
傳代方法   1:3~1:4傳代；每周換液2~3次。
傳代情況 C4
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養(yǎng)法（-）
STR   -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1特性	貼壁生長	上海	3－5天

小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1特性細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1特性操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
CL-0401   NCI-H446(人小細胞肺癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0402   NCI-H520(人肺鱗癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0403   NCI-H524(人非小細胞肺癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0404   NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0405   NCI-H716(人結(jié)直腸腺癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0406   NCI-H838(人非小細胞肺癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0407   NCTC 1469(小鼠正常肝細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0408   NEC(人食管癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0394   NCI-H2170(人肺鱗癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0395   NCI-H2227(人小細胞肺癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0396   NCI-H226(人肺鱗癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0397   NCI-H23(人非小細胞肺癌細胞)   5×106cells/瓶×2
CL-0398   NCI-H2452(人間皮瘤細胞)   5×106cells/瓶×2Claudin 14   緊密連接蛋白14抗體
CMV(1F11)   人巨細胞病毒單克隆抗體
CEA   癌胚抗原抗體
CXCR3   細胞表面趨化因子受體3抗體
C1orf33   1號染色體開放閱讀框33抗體
Phospho-CEBP alpha (Thr222 + Thr226)   磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體
Phospho-CEBP beta (Ser105)   磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體
Phospho-CEBP beta (Thr235)   磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體
Phospho-CD18 (Ser756 + Thr758 + Thr759)   磷酸化整合素β2/Integrin β2抗體
Phospho-CD19 (Tyr531)   磷酸化CD19抗體
小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)；M-1特性CENPA   著絲粒蛋白A
Phospho-CENPA (Ser7)   磷酸化著絲粒蛋白A
Phospho-CRMP2 (Thr514)   磷酸化二氫嘧啶酶樣2抗體
CC16   克拉拉細胞蛋白抗體