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615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS使用說明書

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-01-24 10:02:11瀏覽次數:219次

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產品簡介

615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS使用說明書
形態特性   實體瘤
生長特性  體內生長
特征特性   利用培養的DCS細胞,615小鼠體內移植,形成實體瘤,凍存,可用于建立樹突狀細胞肉瘤體內模型;移植成功率*。 
培養條件    -
傳代方法   制備成細胞懸液接種至615等小鼠。
傳代情況  不詳
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養法(-)
STR   -
同工酶  
染色體   -
使用權限  A類

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
哥倫比亞*(9cm)    10個/包    用于營養要求高細菌的分離、培養和溶血試驗
Columbia Blood Agar        
巧克力瓊脂平板(9cm)    10個/包    用于嗜血桿菌、奈瑟氏菌分離培養
Chocolate Agar        
伊紅美藍瓊脂平板(9cm)    10個/包    弱選擇性培養基、用于分離腸道致病菌,特別是大腸桿菌
Eosin-Methylene Blue Agar        
SS瓊脂平板(9cm)    10個/包    用于沙門氏菌、志賀氏菌的選擇性分離培養
Salmonella Shigella Agar        
HE瓊脂平板(9cm)    10個/包    用于沙門氏菌的選擇性分離培養
Hektoen Enteric Agar        
XLD培養基平板(9cm)    10個/包    選擇性培養基,主要用于分離志賀氏菌屬,亦可用于分離沙門氏菌
Xylose Lysine Desoxycholate Medium        
亞硫酸鉍瓊脂平板(9cm)    10個/包    用于沙門氏菌的選擇性分離
Bismuth Sulfite Agar        DcR2    誘捕受體2抗體
DMAP1    DNA甲基轉移酶相關蛋白1抗體
DMC1    減數分裂同源蛋白DMC1抗體
DNA Ligase III    DNA連接酶3抗體
phospho-DNA PKcs (Thr2638)    磷酸化DNA依賴蛋白激酶抗體
phospho-DNA PKcs (Thr2647)    磷酸化DNA依賴蛋白激酶抗體
DNA polymerase delta p50    DNA聚合酶δ2/DNA pol δ 2抗體
DNA Polymerase delta, catalytic subunit    DNA聚合酶δ催化亞單位/DNA pol δ cat抗體
DNA polymerase eta    DNA聚合酶η抗體
DNA Polymerase gamma    DNA聚合酶γ/DNA pol γ抗體
DNA Polymerase iota    DNA聚合酶ι/DNA pol ι抗體
DNA Polymerase Kappa/POLK    DNA聚合酶κ/DNA pol κ抗體
DNA Polymerase lambda    DNA聚合酶λ/DNA pol λ抗體

 

 


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