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行業(yè)產(chǎn)品

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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司


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雜交瘤（B類）；Z51B3C10H12A12G2F7E7使用說明書

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

聯(lián)系方式：劉夢查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間：2017-01-24 10:11:19瀏覽次數(shù)：161次

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產(chǎn)品簡介

雜交瘤（B類）；Z51B3C10H12A12G2F7E7使用說明書細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱  雜交瘤（B類）；Z51B3C10H12A12G2F7E7使用說明書
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性  懸浮生長
特征特性   可產(chǎn)生單克隆抗體。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   保持細(xì)胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次
傳代情況  C2
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法（-）
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  B類

產(chǎn)品名稱雜交瘤（B類）；Z51B3C10H12A12G2F7E7使用說明書 
貨期3－5天
發(fā)貨地上海

復(fù)蘇操作要點(diǎn)： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。 
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液（含小倒管）    10ml*20支/包    用于大腸菌群、大腸桿菌的測定
Double Lactose Peptone Broth        
四硫磺酸鹽煌綠增菌液（TTB肉湯）    10ml*20支/包    用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
TTB Broth        
RV肉湯    10ml*20支/包    用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
RV Broth        
鹽*增菌液（SC）    10ml*20支/包    用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
Selenite Cystine Broth        
SBG增菌液    10ml*20支/包    用于沙門氏菌的增菌培養(yǎng)
SBG Enrichment Broth        
M肉湯    10ml*20支/包    用于干燥食品和種子中沙門氏菌增菌培養(yǎng)
M Broth        
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯-*    10ml*20支/包    用于阪崎桿菌選擇性增菌培養(yǎng)
Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- VancoMycin        
李氏增菌肉湯LB2    10ml*20支/包    用于李氏菌增菌培養(yǎng)
Listeria Enrichment Broth        
FB2增菌液    10ml*20支/包    用于李氏菌的增菌培養(yǎng)DPP9    二肽基肽酶9抗體
DPP8    二肽基肽酶8抗體
DRD4    多巴胺受體D4抗體
DQX1    DQX1蛋白抗體
DDX5    三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體
phospho-DDX5 (Tyr593)    磷酸化三磷酸腺苷依賴解旋酶ddx5抗體
DYX2/KIAA0319    閱讀障礙相關(guān)蛋白DLX2抗體
Dystrobrevin alpha    肌營養(yǎng)蛋白α抗體
CD299    CD299抗體
DUSP6    雙特異蛋白磷酸酶6/絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶3抗體
Dab1    磷脂蛋白受體Dab1抗體
Phospho-Dab1 (Tyr198)     磷酸化磷脂蛋白受體Dab1抗體
DLX2    同源轉(zhuǎn)錄因子DLX2抗體

 

 


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