【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 雜交瘤（B類）；IB3C10H12A12G2H8F3使用說明書
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產生單克隆抗體；凍存前做支原體去除
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
Digoxin 抗體
Dishevelled 2 蓬亂蛋白2抗體
phospho-Dishevelled 2 (Thr224) 磷酸化蓬亂蛋白2抗體
DR1 protein 轉錄下調蛋白1抗體
DHRS2 脫氫酶/還原酶家族成員2抗體
DSPP 牙本質磷蛋白抗體
Dermokine beta Dermokine β蛋白抗體
DPCR1 DPCR1蛋白抗體
DERP6 表皮源蛋白6抗體
DUSP7 雙特異蛋白磷酸酶7抗體
DUSP26 雙特異蛋白磷酸酶26抗體（絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶8）
DAO1 阿米洛利結合蛋白1抗體
DBF4A S期激酶活化蛋白DBF4A抗體
DSN1 著絲粒相關蛋白DSN1抗體
DCDC2 雙皮層蛋白結構域蛋白DCDC2抗體CVT瓊脂 250g 用于乳制品中嗜冷菌的計數
Nutrient Agar
平板計數肉湯（PCB） 250g 用于濾膜法計數菌落總數
大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌檢驗培養基
乳糖復發酵培養基 250g 用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標準)
Lactose Broth
去氧膽酸鹽瓊脂（DC） 250g 用于大腸菌群固體平板測定
Desoxycholate Lactose Agar
MR-VP培養基 250g 用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(SN標準)
Methyl Red Voges Proskauer Broth
西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂 250g 用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(GB標準)
Simmons Citrate Agar
腸道菌計數瓊脂（VRBDA） 250g 用于腸道菌計數和腸桿菌科鑒別
Violet Red Bile Dextrose Agar
LB肉湯 250g 用于分子生物學中大腸桿菌的培養
LB Broth
