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C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞；RMA培養(yǎng)

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更新時間：2017-01-24 10:25:19瀏覽次數(shù)：325次

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大鼠源細(xì)胞

小鼠源細(xì)胞

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人正常組織來源細(xì)胞

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經(jīng)營模式：代理商

商鋪產(chǎn)品：9963條

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產(chǎn)品簡介

C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞；RMA培養(yǎng)細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

產(chǎn)品名稱	C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞；RMA培養(yǎng)
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

細(xì)胞名稱 C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞；RMA培養(yǎng)
形態(tài)特性   圓形
生長特性懸浮生長
特征特性
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10% 小牛血清
傳代方法
傳代情況
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養(yǎng)法（-）
STR   -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
ERp19   內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp19抗體
ERp72   內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp72抗體
ESAT6   結(jié)核分枝桿菌分泌蛋白ESAT6抗體
eIF1   真核翻譯起始因子1抗體
ESRP2   上皮粘連調(diào)控蛋白ESRP2抗體
ETEA   T細(xì)胞和嗜酸粒細(xì)胞表達(dá)特應(yīng)皮炎蛋白ETEA抗體
ETFDH   電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白脫氫酶抗體
ETL   EGF毒素受體7跨膜結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
ETNK2   乙醇胺激酶2抗體
phospho-ETS1 (Thr38)   磷酸化Ets轉(zhuǎn)錄因子家族ets1抗體
phospho-ECT2 (Ser370)   磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體
EPX   嗜酸粒細(xì)胞過氧化物酶抗體
Endo G   核酸內(nèi)切酶G抗體ETTC乳糖瓊脂   250g   依據(jù)ISO標(biāo)準(zhǔn)制作，用于濾膜法檢測大腸菌群
Lactose TTC agar
MI培養(yǎng)基   1000ml   用于濾膜法計(jì)數(shù)飲用水中大腸埃希氏菌和大腸菌群
MI Medium
結(jié)晶紫中性紅膽鹽肉湯   250g   用于腸道菌增菌培養(yǎng)。
Neutral Red-bile Salt Peptone Glucose Medium
Honda Toxin-Producing Broth
大腸桿菌顯色培養(yǎng)基   1000ml   用于快速、準(zhǔn)確檢測大腸桿菌，培養(yǎng)24小時，顯藍(lán)綠色
E. coli Chromogenic Medium
腸道菌增菌肉湯   250g   用于腸桿菌科細(xì)菌的選擇性增菌培養(yǎng)。
EE Broth
葡萄糖瓊脂   250g   用于細(xì)菌的綜合生化試驗(yàn)
Dextrose Agar

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，智慧城市網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。溫馨提示：為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

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