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上海撫生實業有限公司
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12特性,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞名稱 雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12特性
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產生單克隆抗體;凍存前做支原體去除
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 B類
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
柯氏尿素瓊脂 250g 用于細菌脲酶檢測
MLCB寒天培地 250g 用于沙門氏菌分離培養
MLCB Agar
GN增菌液(10ml) 10ml*20 主要用于志賀氏菌的增菌培養,亦可用于沙門氏菌增菌培養(GB標準)
H-頂層培養基 250g 用于鼠傷寒沙門氏桿菌回復突變試驗(Ames試驗)
zui低營養V-B培養基(底層) 250g 用于鼠傷寒沙門氏桿菌回復突變試驗(Ames試驗)
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粘液酸鹽測試肉湯 1ml*20支
粘液酸鹽質控肉湯 1ml*20支
煌綠肉湯增菌液基礎 250g 用于蛋與蛋制品中沙門氏菌的增菌培養
Brilliant Green Enrichment Broth Base
鹽煌綠增菌液基礎 250g EFHC1 EFHC1蛋白抗體
EFHC2 EFHC2蛋白抗體
EFHD1 EFHD1蛋白抗體
EF-CBP2 突觸結合蛋白2抗體
ENPP2 核苷酸焦磷酸酶2抗體
ECHS1 長鏈烯脂酰*水化酶抗體
ENO1+ENO2+ENO3 神經元,肌肉特異烯醇化酶抗體
EDG3 內皮分化型G蛋白偶聯受體3抗體
ERCC6L 發育相關蛋白ERCC6L抗體(乙醇致畸因子)
Escherichka coli K99 豬源產腸毒素大腸桿菌K99抗體
ENSA α內磺肽抗體
phospho-E2F1 (Ser337) 磷酸化轉錄因子E2F-1抗體
EMR1 表皮生長因子樣激素受體1抗體
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