【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 雜交瘤（B類）；Z173B1C8A11E7B8E2使用說明書
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產生單克隆抗體；凍存前做支原體去除
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細胞密度在1×105～1×106 cells/ml之間，每周換液2～3次
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權限 B類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
Egr1 早期生長應答蛋白1抗體
EMP-1 表皮膜蛋白1抗體
Ephrina1 內皮細胞受體蛋白*激酶A抗體（腫瘤壞死因子α誘導蛋白4）
EPH receptor A4 *蛋白激酶A4抗體
EP3 前列腺素E受體3抗體
Estrogen Receptor alpha 雌激素受體α抗體
ENPP3 ENPP3抗體IgG
ERK1 + ERK2 絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體
ERAS 胚胎干細胞RAS蛋白抗體
ETV7 轉錄因子ETV7抗體
ELAVL1/HuR ELAVL1抗體
Ecat1 胚胎干細胞相關轉錄因子1抗體
EGFRvIII 表皮生長因子受體III型突變體抗體DShigiella Broth
含225mlGN增菌液均質袋 10個/包 用于志賀氏菌的增菌培養，亦可用于沙門氏菌增菌培養。
Muller-kaufmann Tetrathionate Broth
大豆胰酪蛋白胨肉湯（含亞硫酸鐵） 250g 用于沙門氏菌增菌培養
Trypticase Soy Broth with Ferrous Sulfate
弧菌檢驗檢驗培養基
TCBS瓊脂 250g 用于致病性弧菌的選擇性分離（GB、SN標準）
Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar
42℃growth Medium
O/F培養基(HLGB) 250g 用于鑒別弧菌葡萄糖代謝類型（發酵型或氧化型）（SN標準）
O/F Medium
氯化鈉結晶紫增菌液 250g 用于副溶血性弧菌的選擇性增菌培養（GB標準）
Sodium Chloride Violet purple Enrichment Broth
氯化鈉蔗糖瓊脂 250g 用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養（GB標準）
