【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠顱蓋成纖維細胞；OP9使用說明書
形態特性 成纖維樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 OP9細胞株源自新生的op/op 小鼠顱蓋。因編碼M-CSF的基因中的一個突變，它不能生成有功能的巨噬細胞克隆刺激因子(M-CSF)。M-CSF的存在對胚胎干細胞(ES)分化成血細胞而不是其他巨噬細胞有抑制功能。 OP9細胞可以用于與小鼠胚胎干細胞共培養以誘導胚胎干細胞分化成成紅血球來源的、骨髓來源的和B細胞譜系的血細胞。與OP9共培養不需要外源的生長因子或復雜的胚胎結構。這個系統對研究造血細胞的發育和分化的分子機理有用。
培養條件 α－MEM：Alpha Minimum Essential Medium (with Nucleosides) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代；3-4天傳代一次。
傳代情況
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+31%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
E.coli O139 抗志賀毒素大腸桿菌O139抗體（仔豬水腫病志賀毒素大腸桿菌O139）
EGF 表皮生長因子抗體
EGF 表皮生長因子抗體
Phospho-EEF2 (Thr57) 磷酸化真核翻譯延長因子2抗體
EEF2k 真核延伸因子激酶2抗體
Phospho-EEF2k (Ser366) 磷酸化真核延伸因子激酶2抗體
eIF2 alpha 真核啟動因子2α抗體(eIFα2)
Phospho-eNOS (Thr113) 磷酸化一氧化氮合成酶3（內皮型）抗體
EEF2 真核翻譯延長因子2抗體
ERG3 癌基因ERG3抗體
Escherichka coli K88-K99 豬源產腸毒素大腸桿菌K88-K99抗體
FAIM3 FAS凋亡抑制分子3抗體
Fascin1 纖維束1抗體菌種芽孢培養基 250g 用于嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢培養
Bacillus Bacteria Medium
細菌保存培養基 250g 用于嗜熱脂肪芽孢桿菌菌種保存
Bacterial Storage Medium
肝肉瓊脂培養基 250g 用于亞硫酸鹽還原厭氧孢子的計數
溴甲酚紫葡萄糖瓊脂 250g 用于嗜熱需氧芽孢桿菌計數
Bromcresol Purple Dextrose Agar
彎曲桿菌檢驗培養基
產品名稱 產品規格 產品說明及用途
改良Skirrow氏瓊脂基礎 250g 用于彎曲桿菌的分離培養
Skirrow Agar Base ,Modified
布氏瓊脂 250g 用于彎曲桿菌的抗生素敏感性試驗和純化培養。
Brucella Agar
馬尿酸鈉培養基 250g 用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗（GB標準）
