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抗I型補體受體小鼠雜交瘤細胞;1C4復蘇

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更新時間:2017-01-24 11:32:16瀏覽次數:149次

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產品簡介

抗I型補體受體小鼠雜交瘤細胞;1C4復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

抗I型補體受體小鼠雜交瘤細胞;1C4復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。

細胞名稱  抗I型補體受體小鼠雜交瘤細胞;1C4復蘇
形態(tài)特性   淋巴母細胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性   可產生單克隆抗體,抗原為I型補體受體。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   保持細胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況  不詳
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR   -
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

產品名稱生長特性發(fā)貨地貨期
半貼壁生長上海3-5天

細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
腦-心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基    250g    用于糞鏈球菌的增菌培養(yǎng)
Brain-Heart Baptist extraction liquid medium        
KF鏈球菌瓊脂    100g    用于鏈球菌的選擇性分離及計數
KF Streptococcus Agar        
大腸菌群顯色培養(yǎng)基    1000ml    用于快速、準確檢測大腸菌群培養(yǎng)24小時,顯蘭色
Coliform Chromogenic Medium        
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液    250g    用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標準)
Lactose Peptone Broth        
遠藤瓊脂(品紅亞硫酸鈉)培養(yǎng)基    250g    用于濾膜法大腸菌群檢測(GB標準)
Endo Agar        
亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液(BGB)    250g    用于大腸菌群的確證試驗
Brilliant Green Lactose Bile Broth        
硝酸鹽還原試劑盒    5ml*4    用于硝酸鹽還原試驗
KF鏈球菌肉湯    100g    用于鏈球菌的選擇性增菌培養(yǎng)Phospho-FoxO4 (Ser193)    磷酸化叉頭蛋白4抗體
FLT-3    FMS樣*激酶3
Phospho-FLT3(Tyr591)    磷酸化FMS樣*激酶3
Phospho-FLT3 (Tyr589 + Tyr591)    磷酸化FMS樣*激酶3
Phospho-FLT3 (Tyr842)    磷酸化FMS樣*激酶3
Phospho-FLT3 (Tyr969)    磷酸化FMS樣*激酶3
Phospho-c-Fos (Ser32)    磷酸化c-fos抗體
Phospho-c-Fos(Thr232)    磷酸化c-fos抗體
Phospho-c-Fos (Thr325)    磷酸化c-fos抗體
FIH1    缺氧誘導因子1α抑制蛋白抗體
F1 operon positive regulatory protein(NT)    肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體(N端)
Factor H    補體因子H抗體
FSH beta    促卵泡刺激素抗體

 

 


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