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上海撫生實業有限公司
抗補體B因子小鼠雜交瘤細胞;8F11使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
產品名稱 | 抗補體B因子小鼠雜交瘤細胞;8F11使用說明書 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 抗補體B因子小鼠雜交瘤細胞;8F11使用說明書
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 可產生單克隆抗體,抗原為補體B因子。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 保持細胞密度在1×105~1×106 cells/ml之間,每周換液2~3次
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
FOXO4 叉頭蛋白O4抗體
FOX3 神經元核抗原抗體
FAM135B FAM135B蛋白抗體
Fibulin 1 “衰老關鍵蛋白”抗體
FSH receptor 促卵泡刺激素受體抗體
FGF12 成纖維細胞生長因子12抗體
FGF14 成纖維細胞生長因子14抗體
FABPB 腦型脂肪酸結合蛋白抗體
FAM96B FAM96B蛋白抗體
FEZ1 腦胚胎鋅指樣蛋白1抗體
FAM29A FAM29蛋白抗體
FASP1 MaFF相關蛋白抗體
Factor VII *7抗體Power - nitrate medium
卵黃瓊脂培養基基礎 250g 用于肉毒梭菌、產氣莢膜梭菌的分離培養(GB標準)
Egg Yolk Agar Base
亞硫酸鹽-多粘菌素-*瓊脂基礎 250g 用于產氣莢膜梭菌的平板計數(GB標準)
Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine Agar Base
液體硫乙醇酸鹽培養基(FT) 250g 用于產氣莢膜梭菌確證試驗的細菌培養
Thiolglycollate Medium
腦-心浸萃瓊脂培養基 250g 用于糞鏈球菌的純化培養
Brain-extracted agar Baptist Heart
營養瓊脂(水質監測) 250g 用于銅綠假單胞菌純化培養
Nutrient Agar
KF Streptococcus Broth
50%卵黃乳液 5ml*10 每支加入100mlHB0262
50% egg yolk emulsion
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