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上海撫生實業有限公司
小鼠骨髓瘤細胞;P3X63-Ag8復蘇現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
小鼠骨髓瘤細胞;P3X63-Ag8復蘇 | 半貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 小鼠骨髓瘤細胞;P3X63-Ag8復蘇
形態特性 淋巴母細胞
生長特性 半貼壁生長
特征特性 這株細胞源自P3K細胞株(源自漿細胞MOPC-21的組織培養株)。 能抗0.1 mM 8-氮雜*但在HAT培養基中死亡。 據報道它是由于缺失了3-酮類固醇還原酶活性的*營養缺陷型。 檢測表明肢骨發育畸形病毒(鼠痘)陰性。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
Phospho-INPPL1(Tyr986 + Tyr987) 磷酸化肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體
Inhibin Beta C 抑制素βC抗體
IL-16 白介素16抗體
Inhibin beta B 抑制素βB/Inhibin β B抗體
IL-11 白介素11抗體
IL-22R 白介素22受體抗體
IL-26/AK155 白介素26抗體
IL-17D/IL-27 白介素-17D抗體
IBRDC1 環指蛋白217抗體
IL-2 白介素2抗體(人)
IL-23R 白介素-23受體抗體
IGFBP3 胰島素樣生長因子結合蛋白3抗體
IL-6R Beta/CD130/gp130 白細胞介素6受體β抗體IL-6Rβ麥芽汁肉湯 Malt Extract Broth 250g/瓶 含0.6%麥芽浸粉,不含*,用于霉菌和酵母菌的培養
麥芽浸膏湯 Malt Extract Broth 250g/瓶 含1.5%麥芽浸粉,不含*,用于酸性罐頭食品無菌檢驗,也用于霉菌和酵母菌的培養(GB)
麥芽汁瓊脂培養基 Malt Extract Agar Base 250g/瓶 含3%麥芽浸粉,不含*,用于霉菌和酵母菌的分離和培養
桔汁瓊脂(OSA) Orange Serum Agar 250g/瓶 用于耐酸細菌的分離培養
桔汁肉湯(10倍濃縮) Orange Serum Broth Concentrate 10× 250g/瓶 用于耐酸細菌的培養
麥氏(Meclary)瓊脂 Meclary Agar 250g/瓶 用于真菌培養
葡萄糖蛋白胨培養基 Glucose Peptone Medium 250g/瓶 用于真菌和腐生菌的檢驗
營養鹽培養液 Nutrient medium 250g/瓶 用于抗菌性能試驗,每升培養基中添加0.5g吐溫-80
營養鹽瓊脂培養基 Nutrient agar medium 250g/瓶 用于抗菌性能試驗,每升培養基中添加0.5g吐溫-80
葡萄糖蛋白胨瓊脂 Dextrose Peptone Agar 250g/瓶 用于真菌的檢測(日本藥典)。每200ml培養基中添加1支*溶液制成含抗生素的葡萄糖蛋白胨瓊脂
YM肉湯 Yeast Mold Broth 250g/瓶 用于霉菌、酵母菌和其它耐酸菌的培養
YM瓊脂 Yeast Mold Agar 250g/瓶 用于霉菌、酵母菌和其它耐酸菌的培養
馬鈴薯蔗糖瓊脂 Potato Sucrose Agar 250g/瓶 用于真菌的培養
哥倫比亞瓊脂培養基基礎 Columbia Agar Base 250g/瓶 用于梭菌的檢驗,每100ml培養基中添加1支硫酸*
卵黃瓊脂培養基基礎 Egg Yolk Agar Base 250g/瓶 用于梭菌的分離培養,每100ml培養基中添加2支50%卵黃鹽水懸液
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