【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 小鼠前列腺癌細胞；RM-1培養
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
PYG液體培養基 PYG Broth Medium Base 250g/瓶 用于雙歧桿菌乙酸和乳酸代謝物測定，每100ml培養基中添加1支氯化血紅素溶液和1支*1溶液
TPY液體培養基 TPY Broth Medium 250g/瓶 雙歧桿菌F6PPK測定
MRS培養基 MRS Medium(Modified MRS Medium Base） 250g/瓶 用于乳酸菌平板計數，每100ml培養基中添加1支*鋰鹽儲備液制成改良MRS培養基
MC培養基 Chalmers Agar(Modified Chalmers Agar Base） 250g/瓶 用于乳酸菌平板計數，每100ml培養基中添加1支*溶液制成改良MC培養基
雙歧桿菌生化管用基礎培養基 Bifidobacterium Biochemical tests Base Medium 100g/瓶 雙歧桿菌糖發酵生化試驗
MRS肉湯 MRS Broth 250g/瓶 用于乳酸菌增菌
改良番茄汁瓊脂培養基 Tomato Juice Agar,Modified 250g/瓶 用于乳酸菌總數測定
TPY瓊脂培養基 TPY Agar Medium 250g/瓶 用于雙歧桿菌的分離培養
雙歧桿菌BS培養基 Bifidobacterium BS Medium 250g/瓶 用于雙歧桿菌的分離培養
BLB培養基 BLB Medium 250g/瓶 用于雙歧桿菌的分離培養
乳酸桿菌選擇性瓊脂（LBS瓊脂） Lactobacillus Selective Agar 250g/瓶 用于乳酸菌的選擇性分離和培養，每1L培養基中需添加1.32ml冰乙酸
乳酸桿菌選擇性肉湯（LBS肉湯） Lactobacillus Selective Broth 250g/瓶 用于乳酸菌的選擇性培養，每1L培養基中需添加1.32ml冰乙酸IQCG IQCG蛋白抗體
IQCK IQCK蛋白抗體
Id1 DNA結合抑制因子1抗體
IMPDH1 *單磷酸脫氫酶1抗體
IFI78 干擾素誘導蛋白P78抗體
ICAM5 細胞間粘附分子5抗體
IMPAD1 肌醇單磷酸酶IMPA3抗體
Integrin Alpha V + Beta 6 整合素αVβ6抗體
IL-11RA 白介素11受體α/IL-11Rα抗體
ILDR1 免疫球蛋白樣結構域受體1抗體
IKK Alpha + IKK beta KB抑制蛋白激酶α/β抗體 IKK α/IKK β
Interferon alpha 11 干擾素α11抗體
