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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-02-04 09:55:52瀏覽次數(shù):165次
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小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180復(fù)蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180復(fù)蘇 | 懸浮生長 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
I-309 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗體
phospho-IGF1R (Tyr1161) 磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體
IDE 胰島素降解酶抗體
IL-12 白介素12抗體
IL-4 白介素4抗體
IGFBP9 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白9抗體
IFNGR2 干擾素-gamma受體2抗體
IL-27R 白細(xì)胞介素27受體抗體
IL-1RA 白介素-1受體拮抗劑抗體
IKK gamma KB抑制蛋白激酶γ抗體
phospho-IKK gamma (Ser85) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體
phospho-IKK gamma (Ser31) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體改良GAM肉湯基礎(chǔ) GAM Broth Base,Modified 250g/瓶 用于厭氧菌培養(yǎng),每100ml培養(yǎng)基中添加氯化血紅素溶液、*1溶液,可選擇性添加黏菌素溶液、*溶液、煌綠溶液各1支
改良GAM瓊脂基礎(chǔ) GAM Agar Base,Modified 250g/瓶 用于厭氧菌培養(yǎng),每100ml培養(yǎng)基中添加氯化血紅素溶液、*1溶液,可選擇性添加黏菌素溶液、*溶液、煌綠溶液各1支
BDS培養(yǎng)基 BDS Medium 250g/瓶 用于培養(yǎng)擬桿菌
擬桿菌膽汁七葉苷瓊脂基礎(chǔ)(BBE) Bacteroides Bile Esculin Agar Base 250g/瓶 用于脆弱擬桿菌的快速分離,每100ml培養(yǎng)基中添加2支氯化血紅素溶液和5支硫酸*
肉浸液肉湯 Meat Infusion Broth 250g/瓶 用于*的純培養(yǎng)
*卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)(MYP) Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin agar Base 250g/瓶 用于*的計數(shù)、分離,每100ml培養(yǎng)基中添加1支50%卵黃鹽水懸液和1支*溶液
酪蛋白瓊脂 Casein Agar 250g/瓶 用于*的酪蛋白分解試驗
酚紅葡萄糖肉湯 Phenol Red Dextrose Broth 250g/瓶 用于葡萄糖分解試驗
*營養(yǎng)肉湯基礎(chǔ) Lysozyme Nutrient Broth Base 250g/瓶 用于*的*試驗,每200ml培養(yǎng)基中加入1支D-環(huán)*溶液
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)TSPB Trypticase Soy Polymyxin Broth Base 250g/瓶 用于*MPN試驗,每15ml培養(yǎng)基中添加0.1ml21204(吐溫80)
嗜熱脂肪桿菌恢復(fù)瓊脂培養(yǎng)基 Bacillus Stearothermophilus Recovery Agar Media 250g/瓶 用于滅菌與消毒鑒定試驗
無機鹽淀粉瓊脂 ISPMedium4(Inorganic Salts-Starch Agar) 250g/瓶 用于鏈霉菌屬的培養(yǎng)鑒定
甘油天門冬素瓊脂基礎(chǔ) ISPMedium5( Glycerol Asparagine Agar Base) 250g/瓶 用于鏈霉菌屬的培養(yǎng)鑒定,每100ml培養(yǎng)基中需添加1支甘油(甘油)
*瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) ISP Medium 7( Tyrosine Agar Medium Base) 250g/瓶 用于鏈霉菌屬的培養(yǎng)鑒定,每升培養(yǎng)基中需添加15.0g甘油
黃豆粉液體培養(yǎng)基 Soybean powder in liquid culture medium 250g/瓶 用于放線桿菌的培養(yǎng)
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