【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞；AMACR使用說明書
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該雜交瘤細(xì)胞由湖南遠(yuǎn)泰生物技術(shù)有限公司制備并提交，細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗，可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
銀椴苷;椴樹苷 Tiliroside 20316-62-5 594.52 C30H26O13
1,2,3,4,6-五沒食子酰葡萄糖 b-D-Glucopyranose,1,2,3,4,6-pentakis(3,4,5-trihydroxybenzoate) 14937-32-7 C41H32O26
巨大戟醇 INGENOL 30220-46-3 348.43 C20H28O5
紫檀芪 Pterostilbene 537-42-8 256.3 C16H16O3
細(xì)辛脂素 (-)-ASARININ 97 133-05-1 354.356 C20H18O6
扁蓄苷 avicularin 572-30-5 434.35 C20H18O11
蒲公英甾醇乙酸酯 taraxasterol acetate 6426-43-3 468.75408 C32H52O2
15-羥基去氫松香酸
歐夾竹桃苷 Oleandrin 465-16-7 576.72 C32H48O9
金色酰胺醇酯 Benzeneprop*,N-[(1S)-1-[(acetyloxy)methyl]-2-phenylethyl]-a-(benzoylamino)-, (aS)- 56121-42-7 444.52222 C27H28N2O4
歐夾竹桃苷乙 Adynerin 35109-93-4 516.66616 C30H44O7
喬松素 Pinocembrin 480-39-7 256.25 C15H12O4
芫花素 4',5-DIHYDROXY-7-METHOXYFLAVONE 437-64-9 284.26348 C16H12O5Laminin Beta 2 層粘連蛋白β2抗體
LECT1 白細(xì)胞衍生化學(xué)吸引素抗體
LMO2 T淋巴細(xì)胞易位蛋白2抗體
Liprin alpha 1 *磷酸酶受體相互作用蛋白Liprin α1抗體
LONP1 線粒體離子肽酶1抗體
LC3C 微管相關(guān)蛋白輕鏈3C抗體
LZTS1 假定腫瘤抑制*拉鏈蛋白1抗體
LDHC(Cancer,testis antigen 32) 乳酸脫氫酶LDH-C（腫瘤/抗原32）抗體
LUCA15 腫瘤抑制基因LUCA15抗體
LST1 淋巴細(xì)胞特異轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
LEO1 RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體
Phospho-LRP6(Thr1479) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體
phospho-LCK(Tyr394) 磷酸化淋巴細(xì)胞特異蛋白*激酶抗體
LRP5 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體
phospho-LRP5(Thr1492) 磷酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體
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