【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 鼠B淋巴瘤細胞；6A8/6F10/1A6培養
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞由華中科技大學生命科學學院蘇莉教授提交保藏，可用于相關的基礎研究。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C10
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
丁香 Syzygium aromaticum (L.)Merr. et Perry Syringic acid 丁香酸 530-57-4 C9H10O5 ≥98%
廣玉蘭Magnolia grandiflora Syringin pentaacetate 五乙酸紫丁香甙酯 92233-55-1 C27H34O14 ≥95%
中華粗榧Cephalotaxus sinensis Syzalterin 6,8-二甲基芹菜甙元 94451-48-6 C17H14O5 ≥95%
牛七 Twotooth Achyranthes Root Szechenyine 牛七堿 96562-88-8 C36H51 ≥98%
蓽澄茄Piper cubeba threo-1-C-Syringylglycerol 蘇式-1-C-*基丙三醇 121748-11-6 C11H16O6 ≥95%
商陸Phytolacca acinosa α-Spinasterol glucoside ALPHA-波菜甾醇葡糖苷 1745-36-4 C35H58O6 ≥95%
*Prunella vulgaris α-Spinasterone Alpha-菠菜甾酮 23455-44-9 C29H46O ≥98%
大戟科植物鐵海棠 Euphorbia milii ch.des moulins的花 12-O-tetradecanoyl phorbol- 13-acetate 佛波醇 16561-29-8 C36H56O8 ≥98%
云南草蔻Alpinia blepharocalyx 5,7,4'-Tri-O-methylcatechin 5,7,4'-三-O-甲基兒茶精 105330-59-4 C18H20O6 ≥95%Neuroserpin *或半*蛋白水解酶抑制蛋白1抗體
NG2 黑色素瘤*蛋白多糖抗體
Neuroligin 3 突觸細胞粘附分子3抗體
Neuroglycan C 跨膜*蛋白聚糖C抗體
Nova1 神經腫瘤Nova1抗原抗體
NTAL B淋巴細胞鏈接激活蛋白抗體
NSMase2 中鞘磷脂2抗體
NR2E1 核受體蛋白NR2E1抗體
NXPH2 神經外營養蛋白2抗體
NAP1L2 腦特異蛋白BPX抗體
NARF 核纖層蛋白A識別因子抗體
NIMP NOGO相互作用線粒體蛋白1抗體
NLGN4X 神經元X連鎖蛋白/兒童自閉癥相關蛋白抗體
NLGN4Y 神經元Y連鎖蛋白抗體（兒童自閉癥相關蛋白）
