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小鼠雜交瘤細胞;IL-16使用說明書

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-02-04 13:28:41瀏覽次數:136次

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產品簡介

小鼠雜交瘤細胞;IL-16使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱小鼠雜交瘤細胞;IL-16使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  小鼠雜交瘤細胞;IL-16使用說明書
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性   該雜交瘤細胞由湖南遠泰生物技術有限公司制備并提交,細胞注射小鼠腹腔可產生高滴度的單抗,可用于基礎研究和臨床檢驗。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況  C8
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  同工酶鑒定
染色體  
使用權限  A類

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
毛車藤Amalocalyx yunnanensis    Sucrose    蔗糖    57-50-1    C12H22O11    ≥95%
紅根草Salvia prionitis    Sugiol    柳杉酚; 10-脫氧代黃檜醇    511-05-7    C20H28O2    ≥98%
當藥Swertiae Herba    Swertianin    當藥寧    20882-75-1    C14H10O6    ≥98%
酸橙 Citrus aurantium L.    Synephrine    辛弗林    1994/7/5    C9H13NO2    ≥98%
廣玉蘭Magnolia grandiflora    Syringaresinol diacetate    二乙酸丁香樹脂醇酯    1990-77-8    C26H30O10    ≥98%
丁香樹Clove tree    Syringaresinol-di-O- glucoside    丁香樹脂醇雙葡萄糖苷    66791-77-3    C34H46O18    ≥98%
飛龍掌血Toddalia asiatica    5,7,8-Trimethoxycoumarin    5,7,8-*氧基香豆素    60796-65-8    C12H12O5    ≥95%
葉小檗Berberis pruinosa    Tachioside    它喬糖甙    109194-60-7    C13H18O8    ≥98%
王爺葵Tithonia diversifolia    Tagitinin A    圓葉腫柄菊素 A    59979-61-2    C19H28O7    ≥95%
王爺葵Tithonia diversifolia    Tagitinin F    圓葉腫柄菊素 F    59979-57-6    C19H24O6    ≥98%
三尖杉Cephalotaxus fortunei    Taiwanhomoflavone B    none    509077-91-2    C32H24O10    ≥96%
刺柏Juniperus formosana    Yatein    (-)-反式-3-(3,4-亞甲基二氧基芐基)- 2-(3,4,5-*氧基芐基)丁內酯    40456-50-6    C22H24O7    ≤90%NFIB    核因子1B抗體
NAV2    維甲酸誘導神經母細胞瘤蛋白1抗體
NELF    轉錄延伸因子NELF抗體
NELL1    蛋白激酶C結合蛋白NELL1抗體
NELL2    蛋白激酶C結合蛋白NELL2抗體
NETO2    腦特異跨膜蛋白抗體
NFIA    核因子1A抗體
NHLH1    環一螺旋蛋白1抗體
NME4    腫瘤轉移抑制基因H4抗體
    神經元衍生孤兒受體1抗體
Netrin 4    軸突生長誘向因子4抗體
Nectin 4    脊髓灰質炎病毒受體相關蛋白4抗體

 

 


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