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上海撫生實業有限公司
小鼠雜交瘤細胞;IL-16使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
產品名稱 | 小鼠雜交瘤細胞;IL-16使用說明書 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞;IL-16使用說明書
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該雜交瘤細胞由湖南遠泰生物技術有限公司制備并提交,細胞注射小鼠腹腔可產生高滴度的單抗,可用于基礎研究和臨床檢驗。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C8
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
毛車藤Amalocalyx yunnanensis Sucrose 蔗糖 57-50-1 C12H22O11 ≥95%
紅根草Salvia prionitis Sugiol 柳杉酚; 10-脫氧代黃檜醇 511-05-7 C20H28O2 ≥98%
當藥Swertiae Herba Swertianin 當藥寧 20882-75-1 C14H10O6 ≥98%
酸橙 Citrus aurantium L. Synephrine 辛弗林 1994/7/5 C9H13NO2 ≥98%
廣玉蘭Magnolia grandiflora Syringaresinol diacetate 二乙酸丁香樹脂醇酯 1990-77-8 C26H30O10 ≥98%
丁香樹Clove tree Syringaresinol-di-O- glucoside 丁香樹脂醇雙葡萄糖苷 66791-77-3 C34H46O18 ≥98%
飛龍掌血Toddalia asiatica 5,7,8-Trimethoxycoumarin 5,7,8-*氧基香豆素 60796-65-8 C12H12O5 ≥95%
葉小檗Berberis pruinosa Tachioside 它喬糖甙 109194-60-7 C13H18O8 ≥98%
王爺葵Tithonia diversifolia Tagitinin A 圓葉腫柄菊素 A 59979-61-2 C19H28O7 ≥95%
王爺葵Tithonia diversifolia Tagitinin F 圓葉腫柄菊素 F 59979-57-6 C19H24O6 ≥98%
三尖杉Cephalotaxus fortunei Taiwanhomoflavone B none 509077-91-2 C32H24O10 ≥96%
刺柏Juniperus formosana Yatein (-)-反式-3-(3,4-亞甲基二氧基芐基)- 2-(3,4,5-*氧基芐基)丁內酯 40456-50-6 C22H24O7 ≤90%NFIB 核因子1B抗體
NAV2 維甲酸誘導神經母細胞瘤蛋白1抗體
NELF 轉錄延伸因子NELF抗體
NELL1 蛋白激酶C結合蛋白NELL1抗體
NELL2 蛋白激酶C結合蛋白NELL2抗體
NETO2 腦特異跨膜蛋白抗體
NFIA 核因子1A抗體
NHLH1 環一螺旋蛋白1抗體
NME4 腫瘤轉移抑制基因H4抗體
神經元衍生孤兒受體1抗體
Netrin 4 軸突生長誘向因子4抗體
Nectin 4 脊髓灰質炎病毒受體相關蛋白4抗體
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