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上海撫生實業有限公司
鼠/人雜交瘤細胞系;Hybrid Liver cell GLH04培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
產品名稱 | 鼠/人雜交瘤細胞系;Hybrid Liver cell GLH04培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 鼠/人雜交瘤細胞系;Hybrid Liver cell GLH04培養
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C8
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
水蓼Polygonum hydropiper 12-Hydroxyisodrimenin 12-羥基異辛辣木素; (3S,5aS,9aS)-4,5,5a,6,7,8,9,9a-八氫-3-羥基-6,6,9a-*基萘并[1,2-c]呋喃-1(3H)-酮 218780-16-6 C15H22O3 ≤90%
水蓼Polygonum hydropiper Humulene epoxide II 環氧化蛇麻烯 II 19888-34-7 C15H24O ≥97%
水蓼Polygonum hydropiper Methyl isodrimeninol (1R,5aS,9aS,9bR)-1,3,5,5a,6,7,8,9,9a,9b-十氫-1-甲氧基-6,6,9a-*基萘并[1,2-c]呋喃 442851-27-6 C16H26O2 ≥96%
水紅木Viburnum cylindricum 27-p-Coumaroyloxyursolic acid 27-對香豆酰氧基熊果酸 73584-67-5 C39H54O6 ≥95%
水紅木Viburnum cylindricum 6-O-Caffeoylarbutin 6-O-咖啡酰基熊果甙 136172-60-6 C21H22O10 ≥96%
水紅木Viburnum cylindricum 9-O-Feruloyl-5,5'-dimethoxylariciresinol none 166322-14-1 C32H36O11 ≥95%
水紅木Viburnum cylindricum Glucosyringic acid 丁香酸葡萄糖苷 33228-65-8 C15H20O10 ≥95%
水紅木Viburnum cylindricum Isolariciresinol 異落葉松脂素 548-29-8 C20H24O6 ≥97%P2RX6 三磷酸腺苷受體P2X6抗體
PRR7 突觸富含*膜蛋白7抗體
PEX5L 過氧化物酶體生成蛋白5相關蛋白抗體
P2Y6 G蛋白偶聯嘌呤受體p2y6抗體
PSGR 前列腺特異G蛋白偶聯受體/嗅覺受體51E2抗體
P2Y11 G蛋白偶聯嘌呤受體p2y11抗體
P2Y12 G蛋白偶聯嘌呤受體p2y12抗體
P2Y8 G蛋白偶聯嘌呤受體p2y8抗體
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