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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-02-06 09:55:25瀏覽次數(shù):141次
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小鼠雜交瘤細(xì)胞;HB JDSHCNS5-1復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞;HB JDSHCNS5-1復(fù)蘇 | 半貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞;HB JDSHCNS5-1復(fù)蘇
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C7
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
毛茛科植物烏頭 Aconitum carmichaeli debx.的根 Fuziline 附子靈 80665-72-1 C24H39NO7 ≥98%
毛茛科植物多被銀蓮花 Anemone Raddeana Raddeanoside R8 多被銀蓮花皂苷R8 124961-61-1 C65H106O30 ≥98%
毛茛科植物打破碗花 Anemone hupehensis Huzhangoside D 虎掌草皂甙D 96315-53-6 C64H104O30 ≥98%
毛茛科植物打破碗花 Anemone hupehensis Presapogenin CP4 75799-18-7 C46H74O15 ≥98%
毛茛科植物打破碗花 Anemone hupehensis Prosapogenin A 薯蕷次皂苷 A 19057-67-1 C39H62O12 ≥98%
毛茛科植物打破碗花 Anemone hupehensis Prosapogenin CP6 薯蕷次皂苷 CP6 72629-76-6 C46H74O16 ≥98%
毛茛科植物粗果唐松草 (ThalictrumdasycarpumFisch.etHall.) Magnoflorine 木蘭花堿 2141--9-5 C20H24NO4+ ≥98%
毛茛科植物粗果唐松草 (ThalictrumdasycarpumFisch.etHall.) Magnoflorine chloride 氯化木蘭花堿 6681-18-1 C20H24ClNO4 ≥98%
毛茛科植物粗果唐松草 (ThalictrumdasycarpumFisch.etHall.) Magnoflorine Iodide 碘化木蘭花堿 4277-43-4 C20H24NO4.I ≥98%
毛茛科植物北烏頭 AconitumkusnenzoffiiReichb. Higenamine hydrochloride 去甲*堿鹽酸 11041-94-4 C16H17NO3.HCl ≥98%
毛茛科金蓮花屬植物金蓮花 (Flos Trollii Chinensis) 2"-O-beta-L- galactopyranosylorientin 葒草素-2"-O-BETA-L- 半乳糖苷 861691-37-4 C27H30O16 ≥98%90RSK */*激酶p90RSK蛋白抗體
RCC1 染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體
Phospho-RCC1 (Ser11) 磷酸化染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體
RPS6 S6核糖體蛋白抗體
RPS6KB1 核糖體S6蛋白激酶抗體
Rad52 Rad52抗體
RNF150 環(huán)指蛋白150抗體
RANTES T細(xì)胞特異趨化因子抗體
RAGE 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異受體抗體
RNF12 環(huán)指蛋白12抗體
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