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小鼠雜交瘤細胞;BDRXN-2使用說明書

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-02-06 11:33:56瀏覽次數:143次

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產品簡介

小鼠雜交瘤細胞;BDRXN-2使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱小鼠雜交瘤細胞;BDRXN-2使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  小鼠雜交瘤細胞;BDRXN-2使用說明書
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
黑果山姜 Alpinianigra(Gaertn.)Burtt    Kaempferol-3-O-glucuronide    酚葡萄糖醛酸苷    22688-78-4    C21H18O12    ≥98%
黑豆 Glycinemax(L.)merr    Cyanidin 3-O-glucoside    矢車菊素-3-O-葡萄糖苷    7084-24-4    C21H21CLO11    ≥98%
荷葉Folium Nelumbinis    Nuciferine    荷葉堿    475-83-2    C19H21NO2    ≥98%
何首烏Polygonum multiflorum    Polygonal    (3R,4aS,8aS)-3-羥基-5,5,8a-*基-3,4,4a,6,7,8-六氫萘-2-甲醛    72537-20-3    C14H22O2    ≥98%
何首烏Polygonum multiflorum    2,3,5,4'-Tetrahydroxystilbene 2-O-glucoside    2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷    82373-94-2    C20H22O9    ≥95%
何首烏 Polygonum multiflorum Thunb.    2,3,5,4'-Tetrahydroxystilbene- 2-Ο-β-D-glucoside    何首烏苷    55327-45-2    C20H22O9    ≥98%
何首烏 Eucommia ulmoides Oliv    Pinoresinol Diglucoside    松脂醇二葡萄糖苷    63902-38-5    C32H42O16    ≥98%
合歡Albizia julibrissin    Phloracetophenone    2,4,6-三羥基苯乙酮    480-66-0    C8H8O4    ≥95%
合歡Albizia julibrissin    Phloracetophenone 4'-O-glucoside    none    5027-30-5    C14H18O9    ≥95%
合歡 Albizia julibrissin Durazz.    Quercitrin    槲皮苷    522-12-3    C21H20O11    ≥98%
x旱冬瓜Alnus nepalensis    3-O-Methylducheside A    3,3'-二-O-甲基-4-O-(BETA-D-吡喃木糖基)鞣花酸    62218-23-9    C21H18O12    ≥98%
旱冬瓜Alnus nepalensis    Platyphyllenone    1,7-雙(4-羥基苯基)-4-庚烯-3-酮    56973-65-0    C19H20O3    ≥98%
旱冬瓜Alnus nepalensis    Rubranol    (R)-1,7-雙-(3,4-二羥基苯基)-5-羥基庚烷    211126-61-3    C19H24O5    ≥98%Phospho-TSC2 (Thr1462)    磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節硬化)抗體
Phospho-Tuberin (Thr927)    磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節硬化)抗體
phospho-Tau protein(Ser396)    磷酸化微管相關蛋白抗體
TNK1    非受體型*蛋白激酶Tnk1抗體
Phospho-TNK1 (Tyr277)    磷酸化非受體型*蛋白激酶Tnk1抗體
phospho-TOPO II Alpha (Ser1106)    磷酸化DNA拓普西異構酶Ⅱ抗體
TORC1    環腺苷酸應答元件結合蛋白轉錄共激活因子TORC1抗體
Phospho-Torc1 (Ser151)    磷酸化CREB轉錄共激活因子TORC1抗體
TORC2    CREB轉錄共激活因子TORC2抗體
TNF beta    腫瘤壞死因子β抗體(TNFβ)
CF7L2    轉錄因子7類似物2抗體
TBX2    血栓素B2(一種新發現的抑癌基因)抗體
TSSK6    特異*/*激酶6抗體
TSEN2    tRNA剪接內切酶2抗體
D53    腫瘤蛋白D53抗體

 

 


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