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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-02-07 10:08:09瀏覽次數(shù):188次
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雜交瘤細(xì)胞;A8特性現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
雜交瘤細(xì)胞;A8特性 | 半貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞;A8特性
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
CD133 造血干細(xì)胞抗原(多肽抗原)
CD147/EMMPRIN(Extracellular matrix metalloproteinase inducer) CD147(抗原)
CD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原
CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴細(xì)胞衰減蛋白(抗原)
CXCR1 (CXC-chemokine receptor 1) 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗原
COX-2 (Prostaglandin-endoperoxide synthase-2) 前列腺素氧化環(huán)化酶2(抗原)
c-phycocyanin(C-PC) C-藻藍(lán)素(藻藍(lán)蛋白)
CTGF (connective tissue growth factor) 結(jié)締組織生長因子(多肽抗原)
Cyclin E 周期素E/原癌基因抗原
Dnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A) DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α(抗原)
Cyclin C 周期素 C(抗原)穿心蓮 Andrographis Paniculata Nees Dehydroandrographolide 脫水*內(nèi)酯 134418-28-3 C20H28O4 ≥98%
* Andrographis Paniculata Nees Dehydroandrographolidesuccinate 脫水*內(nèi)酯 琥珀酸半酯 786593-06-4 C28H36O10 ≥98%
蓬莪術(shù)Curcuma zedoaria Dehydrochromolaenin none 20013-76-7 C15H14O ≥95%
刻葉紫堇 Corydalis incisa Pers. Dehydrocorydalin 脫氫紫堇堿 30045-16-0 C22H24N2O7 ≥98%
云木香 Saussurea Lappa Dehydrocostus lactone 去氫木香內(nèi)酯 477-43-0 C15H18O2 ≥98%
一文錢Stephania delavayi Dehydrocrebanine 去氫克班寧 77784-22-6 C20H19NO4 ≥95%
苦木Picrasma quassioides Dehydrocrenatidine 去氫苦木堿 65236-62-6 C15H14N2O2 ≥98%
苦木Picrasma quassioides Dehydrocrenatine 1-乙烯基-4-甲氧基-9H-吡啶并[3,4-b]吲哚 26585-13-7 C14H12N2O ≥90%
大魚藤樹Derris robusta Dehydrodeguelin 去氫魚藤素 3466-23-7 C23H20O6 ≥98%
白線薯Stephania brachyandra Dehydrodicentrine 去氫荷包牡丹堿 C20H19NO4 ≥98%
肉豆蔻MyristicayunnanensisY.H.Li Dehydrodiisoeugenol 去氫二異* 2680-81-1 C20H22O4 ≥98%
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