雜交瘤細(xì)胞；5-PeS1(2-D8)復(fù)蘇來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
| 產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
| 雜交瘤細(xì)胞；5-PeS1(2-D8)復(fù)蘇 | 半貼壁生長 | 上海 | 3－5天 |
細(xì)胞名稱 雜交瘤細(xì)胞；5-PeS1(2-D8)復(fù)蘇
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
雜交瘤細(xì)胞；5-PeS1(2-D8)復(fù)蘇細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
雜交瘤細(xì)胞；5-PeS1(2-D8)復(fù)蘇操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
CD68 CD68抗原
CD117/c-kit/SCFR 干細(xì)胞生長因子受體/細(xì)胞表面分化抗原（抗原）
CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降鈣素基因相關(guān)肽
Fabp2 (fatty acid binding protein 2, intestinal) 脂肪酸結(jié)合蛋白2(抗原)
ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關(guān)基因（抗原）
Fibronectin (FN) 纖維連結(jié)蛋白(多肽抗原)
FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細(xì)胞生長因子-7/纖維母細(xì)胞生長因子 (抗原)長序虎皮楠Daphniphyllum longeracemosum Daphnilongeranin C none 750649-07-1 C22H29NO3 ≥95%
夜香牛Vernonia cinerea Dehydroespeletone 1-(5-乙酰基-2-甲氧基苯基)-3-甲基丁-2-烯-1-酮 51995-99-4 C14H16O3 ≥98%
姜黃 Curcuma longa L. Demethoxycurcumin 去甲氧基姜黃素 297160-27-1 C20H18O5 ≥98%
卡瓦胡椒 Kava Demethoxyyangonin 去甲氧基醉椒素 15345-89-8 C14H12O3 ≥98%
黃柏 Phellodendron amucrense Rupr Demethyleneberberine 去亞甲基小檗堿 25459-91-0 C19H18NO4 ≥98%
齒葉黃皮Clausena dunniana Demethylmurrayanine 1-羥基-9H-咔唑-3-甲醛 123497-84-7 C13H9NO2 ≥95%
陳皮 Citrus tangerina Hort.et Tanaka C.erythrosa Tanaka Demethylnobiletin 去甲基川陳皮素 2174-59-6 C20H20O8 ≥98%
菊薯Smallanthus sonchifolius Demethylsonchifolin (3AR,4R,6E,10E,11AR)-2,3,3A,4,5,8,9,11A-八氫-10-甲基-3-亞甲基-4-[[(2Z)-2-甲基-1-氧代-2-丁烯-1-基]氧基]-2-氧代環(huán)癸并[C]呋喃-6-羧酸 956384-55-7 C20H24O6 ≥95%
雜交瘤細(xì)胞；5-PeS1(2-D8)復(fù)蘇吳茱萸Evodia rutaecarpa Demethylsuberosin none 21422-04-8 C14H14O3 ≥95%
大魚藤樹Derris robusta Demethylvestitol none 65332-45-8 C15H14O4 ≥97%
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