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雜交瘤細胞;4.00E+10使用說明書

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-02-07 10:18:48瀏覽次數:96次

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產品簡介

雜交瘤細胞;4.00E+10使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱  雜交瘤細胞;4.00E+10使用說明書
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C3
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

產品名稱雜交瘤細胞;4.00E+10使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
華山松Pinus armandii    Dihydropinosylvin methyl ether    二氫銀松素甲醚    17635-59-5    C15H16O2    ≥95%
臭常山Orixa japonica    Dihydroresveratrol    二氫白藜蘆醇    58436-28-5    C14H14O3    ≥96%
臭常山Orixa japonica    Dihydroresveratrol 3-O-glucoside    二氫白藜蘆醇 3-O-葡萄糖甙    100432-87-9    C20H24O8    ≥98%
國槐Sophora japonica    Dihydrorobinetin    刺槐亭    4382-33-6    C15H12O7    ≥95%
丹參 Salvia miltiorrhiza Bge.    Dihydrotanshinone I    二氫丹參酮 I    87205-99-0    C18H14O3    ≥98%
麻風樹Jatropha curcas    Dimeric coniferyl acetate    乙酸二聚松柏酯    184046-40-0    C24H26O8    ≥95%
紅椿Toona ciliate    Dimethyl phthalate    鄰苯二甲酸二甲酯, 避蚊酯    131-11-3    C10H10O4    ≥95%
白蠟Fraxinus chinensis Roxb.    Dimethylfraxetin    白蠟樹素    6035-49-0    C12H12O5    ≥98%
金錢松Pseudolarix kaempferi    Dimethylmatairesinol    甲基牛蒡酚; 甲基牛蒡子素    25488-59-9    C22H26O6    ≥98.5%
黃藥子Dioscorea bulbifera Linn.    Diosbulbin B    黃獨素B    20086-06-0    C19H20O6    ≥98%
黃獨Dioscorea bulbifera    Diosbulbin C    黃獨素 C,黃藥子素 C    20086-07-1    C19H22O7    ≥98.5%Lumbrokinase    蚯蚓纖溶酶(*抗原)
Livin (Inhibitors of apoptosis proterins Livin)    一種新的凋亡抑制蛋白(抗原)
p38 MAPK/MKK3/MAPKK14    絲裂原活化蛋白激酶p38(抗原)
Metal ion transporter    擬南介金屬離子轉運蛋白(抗原)
MADCAM-1    黏膜選址素(抗原)
MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;)    髓鞘相關糖蛋白a/b(抗原)
MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a )    髓鞘相關糖蛋白(抗原)

 

 

 


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