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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-02-07 10:32:34瀏覽次數(shù):93次
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雜交瘤細胞;2C5復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
雜交瘤細胞;2C5復(fù)蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
細胞名稱 雜交瘤細胞;2C5復(fù)蘇
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 半貼壁生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 未定
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
半貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應(yīng)將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜氨酸環(huán)肽
CRP (C-reactive protin) C-反應(yīng)蛋白(抗原)
Clenbuterol/BSA 克侖特羅偶聯(lián)牛血清白蛋白
Clenbuterol/KLH 克侖特羅偶聯(lián)血藍蛋白
CRIPTO 畸胎瘤衍化生長因子抗原(表皮生長因子相關(guān)肽)N端
Cytokeratin 19 細胞角蛋白19多肽抗原
CEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原
CD105 CD105/轉(zhuǎn)化生長因子β受體抗原
Caspase-6 (NT) 半胱胺酸蛋白酶蛋白-6(抗原)盆架樹Winchia calophylla Echitamine 埃奇胺 6871-44-9 C22H29N2O4 ≥98%
顯脈香茶菜Rabdosia nervosa Effusanin A 疏展香茶菜寧 A 30220-43-0 C20H28O5 ≥98%
蒼石榴Punica granatum L. Ellagic acid 鞣花酸 476-66-4 C14H6O8 ≥98%
大果榕Ficus auriculata Elliotinol 濕地* 10178-31-1 C20H32O ≥95%
吐根 Ipecac Emetine Hydrochloride 鹽酸 14198-59-5 C29H40ClN2O4- ≥98%
黃芪 A.mongholicus Bunge Emgelitin 黃杞苷 572-31-6 C21H22O10 ≥98%
大黃Rheum officinale Baill Emodin 大黃素 518-82-1 C15H10O5 ≥98%
大黃Rheum officinale Baill Emodin 1-glucoside 大黃素-1-O-葡萄糖苷 38840-23-2 C21H20O10 ≥98%
大黃Rheum officinale Baill Emodin-8-O-β-D- glucopyranoside 大黃素-8-O-β-D- 葡萄糖苷 23313-21-5 C21H20O10 ≥98%
臭靈丹Laggera pterodonta enantio-7(11)-Eudesmen-4-ol (+)-刺柏腦 186374-63-0 C15H26O ≥95%
王爺葵Tithonia diversifolia Encecalin 英西卡林 20628-09-5 C14H16O3 ≥96%
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