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雜交瘤細胞;6B8D11H12培養

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品       牌

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所  在  地上海

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更新時間:2017-02-07 11:08:25瀏覽次數:703次

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產品簡介

雜交瘤細胞;6B8D11H12培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

產品名稱雜交瘤細胞;6B8D11H12培養
貨期3-5天
發貨地上海

細胞名稱  雜交瘤細胞;6B8D11H12培養
形態特性   淋巴母細胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C3
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
人參 Panax ginseng C.A.Mey    Ginsenoside Ro    人參皂苷Ro    34367-04-9    C48H76O19    ≥98%
珊瑚菜Glehnia littoralis    Ginsenoyne K    (3R,10S,8E)-10-氫過氧-1,8-十七碳二烯-4,6-二炔-3-醇    141947-42-4    C17H24O3    Unstable
百合科植物知母 Anemarrhena asphodeloides Bge    Gitogenin    吉托皂苷元    511-96-6    C27H44O4    ≥98%
刺桐Erythrina arborescens    Glabranin    光甘草寧    41983-91-9    C20H20O4    ≥99%
光甘草 (歐亞甘草) Glycyrrhiza glabra L.    Glabridin    光甘草定    59870-68-7    C20H20O4    ≥98%
光滑黃皮Clausena lenis    Glaucin B    海堿B    115458-73-6    C28H32O10    ≥97%
本品為唇形科植物冬凌草 Rabdosiarubescens(Hamst.)C.Y.WuetHsuan    Glaucocalyxin A    藍萼甲素    79498-31-0    C20H28O4    ≥98%
刺桐Erythrina arborescens    Glepidotin B    鱗葉甘草素B    87440-56-0    C20H20O5    ≥97%
鞭打繡球Hemiphragma heterophyllum    Globularin    球花苦苷    1399-49-1    C24H28O11    ≥95.5%植物*1(VK1)免疫試劑盒    Plant Vitamin K1,VK1 ELISA Kit
植物*(VE)免疫試劑盒    Plant Vitamin E,VE EELISA Kit
植物*3(VD3)免疫試劑盒    Plant Vitamin D3,VD3 ELISA kit
植物*2(VD2)免疫試劑盒    Plant Vitamin D2,VD2 ELISA Kit
植物*(VD)免疫試劑盒    Plant Vitamin D,VD ELISA Kit
植物*(VC)免疫試劑盒    Plant Vitamin C,VC ELISA Kit
植物花生四烯酸(AA)免疫試劑盒    Plant arachidonic Acid,AA ELISA kit
蜴雄烯二酮(ASD)免疫試劑盒    Lizard androstenedione,ASD ELISA kit
家Sulphaquinoxaline(磺胺喹噁林)免疫試劑盒    Sulphaquinoxaline ELISA Kit

 

 


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