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雜交瘤細(xì)胞;3G12特性

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產(chǎn)品型號

品       牌

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所  在  地上海市

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更新時間:2017-02-08 09:02:19瀏覽次數(shù):167次

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產(chǎn)品簡介

雜交瘤細(xì)胞;3G12特性現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品名稱生長特性發(fā)貨地貨期
雜交瘤細(xì)胞;3G12特性半貼壁生長上海3-5天

細(xì)胞名稱  雜交瘤細(xì)胞;3G12特性
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性  半貼壁生長
特征特性   該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  未定

來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
 小鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse regenerating gene 1a,REG-1a ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse apolipoprotein H,Apo-H ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠載脂蛋白B48(apo-B48)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse Apolipoprotein B48,apo-B48 ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse Apolipoprotein A5,apo-A5 ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit    ,英文名:    Mouse Progesterone,PROG ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T
小鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)IgM抗體ELISA Kit    ,英文名:    Mouse keyhole limpet hemocyanin(KLH)IgM antibody ELISA Kit    ,規(guī)格:    48T/96T五色梅Lantana camara    Rehmannic acid    巖茨烯 A    467-81-2    C35H52O5    ≥97%
玄參科植物地黃 Rehmannia glutinosa    Rehmannioside A    地黃甙 A    81720-05-0    C21H32O15    ≥98%
千里光Senecio scandens    Rengynic acid    連翹酸    517883-38-4    C8H14O4    ≥98%
臭牡丹Clerodendrum colebrookianum    Rengyol    連翹環(huán)己醇    93675-85-5    C8H16O3    ≥95%
蘿芙木屬植物蛇根木 Rauwolfia serpentina Benth.    Reserpine    *    50-55-5    C33H40N2O9    ≥98%
蟾蜍 Bufo bufo gargarizans Cantor    Resibufogenin    酯蟾毒配基    465-39-4    C24H32O4    ≥98%
Cordia ecalyculata    Resorcinol    *    108-46-3    C6H6O2    ≥95%
虎杖 Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.    Resveratrol    白藜蘆醇    501-36-0    C14H12O3    ≥98%
Isol from coml. Japanese rhubarbs (Rheum spp.)    Resveratrol 4'- (6-galloylglucoside)         64898-03-9    C27H26O12    ≥98%

 

 


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