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上海撫生實業(yè)有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間:2017-02-08 09:27:39瀏覽次數(shù):117次
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小鼠雜交瘤細(xì)胞株;L8F12特性現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株;L8F12特性 | 半貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞株;L8F12特性
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA Kit ,英文名: Mouse transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
小鼠*12(VB12)ELISA Kit ,英文名: Mouse Vitamin B12,VB12 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA Kit ,英文名: Mouse microalbunminuria,MAU/ALB ELISA kit ,規(guī)格: 48T/96T
小鼠*核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA Kit ,英文名: Mouse uridine phosphorylase 1,UPP1 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
小鼠*型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA Kit ,英文名: Mouse Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA kit ,規(guī)格: 48T/96T
小鼠*型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA Kit ,英文名: Mouse urokinase plasminogen activator,uPA ELISA kit ,規(guī)格: 48T/96T
小鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA Kit ,英文名: Mouse brain natriuretic peptide,BNP ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
小鼠腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)ELISA Kit ,英文名: Mouse encephalomyelitis virus(EV)antibody(IgG)ELISA kit ,規(guī)格: 48T/96T
小鼠腦啡肽原B(PDYN)ELISA Kit ,英文名: Mouse Proenkephalin-B,PDYN ELISA kit ,規(guī)格: 48T/96T
小鼠腦啡肽原A(PENK)ELISA Kit ,英文名: Mouse proenkephalin A,PENK ELISA kit ,規(guī)格: 48T/96T
小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)ELISA Kit ,英文名: Mouse visfatin ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T*鈉 Methicillin SodiuM (AS) 7246-14-2
* MethocarbaMol 532-03-6
* MethscopolaMine BroMide 155-41-9
癸酸甲酯 Methyl Caprate 110-42-9
巴豆酸甲酯;丁烯酸甲酯 Methyl crotonate;Methyl-α-crotonate 623-43-8
反*甲酯(C18∶2) METHYL LINOLELAIDATE STANDARD FOR GC(-20℃) 2566-97-4
亞麻酸甲酯;;;9,12,15-三烯十八酸甲酯 Methyl Linolenate 301-00-8
壬酸甲酯 Methyl nonanoate;Pelargonic acid Methyl ester 1731-84-6
二十四酸甲酯;二十四烷酸甲酯 Methyl tetracosanoate;Methyl lignocerate; Lignoceric acid Methyl ester 2442-49-1
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