小鼠雜交瘤細(xì)胞株；P-7E11-IgA培養(yǎng)

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產(chǎn)品簡介

小鼠雜交瘤細(xì)胞株；P-7E11-IgA培養(yǎng)細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

產(chǎn)品名稱	小鼠雜交瘤細(xì)胞株；P-7E11-IgA培養(yǎng)
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

細(xì)胞名稱 小鼠雜交瘤細(xì)胞株；P-7E11-IgA培養(yǎng)
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長特性懸浮生長
特征特性   該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限未定

復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
小鼠抗線粒體ADP/ATP載體(AAC)抗體ELISA Kit   ，英文名：   Mouse anti-mitochondrial ADP/ATP carrier(AAC)antibody ELISA kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠抗透明帶抗體IgG(aZP-IgG)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse anti-zona pellucida antibody IgG,aZP-IgG ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠抗核小體抗體(IgG)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse anti-nucleosome antibody IgG ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse Desmin,Des ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse Caveolin-1,CAV1 ELISA kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠角化細(xì)胞生長因子(KGF/FGF-7)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse Keratinocyte Growth Factor,KGF/FGF-7 ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠膠原酶I(Collagenase I)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse Collagenase I ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠膠原吡啶交聯(lián)(PYD)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse pyridinoline,PYD ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T
小鼠降鈣素原(PCT)ELISA Kit   ，英文名：   Mouse Procalcitonin,PCT ELISA Kit   ，規(guī)格：   48T/96T*   Griseofulvin;AMudane;Curling factor;Fulcin;Fulvicin;Grifulvin;Grisact   126-07-8
黃原膠   GuM xanthan;Polysaccharide B-1459;Keltrol F;Kelzan   11138-66-2
氯氟舒松   Halcinonide   3093-35-4
LC242   HCM-002   187585-64-4
   HCM-006   223572-88-1
二十一烷   Heneicosane   629-94-7
十七酸;珠光脂酸   Heptadecanoic acid;Heptadecylic acid   506-12-7
十七醇;1-羥基十七烷   Heptadecanol;1-Heptadecanol;Alcohol C17;1-Hydroxyheptadecane   1454-85-9
庚二酸;蒲桃酸;1,5-戊烷二羧酸   Heptanedioic acid;1,5-Pentanedicarboxylic acid;Dicarboxylic acid C7   111-16-0
六氟丙烯;全氟丙烯   Hexafluoropropene;Hexafluoropropylene;Perfluoropropene   116-15-4
*   Hydralazine Hydrochloride   304-20-1

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