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上海撫生實業有限公司
小鼠雜交瘤細胞株;PEAA-3B5培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
產品名稱 | 小鼠雜交瘤細胞株;PEAA-3B5培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 小鼠雜交瘤細胞株;PEAA-3B5培養
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
山羊血管緊張素Ⅰ(ANG-Ⅰ)ELISA Kit ,英文名: Goat angiotension Ⅰ,ANG-Ⅰ ELISA Kit ,規格: 48T/96T
山羊褪黑素(MT)ELISA Kit ,英文名: Goat Melatonin,MT ELISA Kit ,規格: 48T/96T
山羊銅藍蛋白(CP)ELISA Kit ,英文名: Goat Ceruloplasmin,CP ELISA Kit ,規格: 48T/96T
山羊瘦素(LEP)ELISA Kit ,英文名: Goat Leptin,LEP ELISA kit ,規格: 48T/96T
山羊生長激素(GH)ELISA Kit ,英文名: Goat growth hormone,GH ELISA KIT ,規格: 48T/96T
山羊三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA Kit ,英文名: Goat Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit ,規格: 48T/96T
山羊熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA Kit ,英文名: Goat Heat Shock Protein 70,HSP-70 ELISA KIT ,規格: 48T/96T
山羊醛固酮(ALD)ELISA Kit ,英文名: Goat aldosterone,ALD ELISA Kit ,規格: 48T/96T
山羊前列腺素內過氧化物合酶1(前列腺素G/H合酶和環氧合酶)(PTGS1)ELISA Kit ,英文名: Goat PTGS1 ELISA kit ,規格: 48T/96TS-Carboxymethyl-L-Cysteine * 100微克 BR,99%
Scandium oxide 鈧氧 100克 BR,98%
SB3-8 3-(N,N-二甲基辛基銨)丙烷-1-磺酸內鹽 25克 CP
SB3-12 3-(N,N-二甲基十二烷基銨)丙烷磺酸鈉 1克 色固
SB3-10 3-(癸基二甲基銨)丙烷-1-磺酸內鹽 100毫克 AR,80%
Saturated picric acid Buffer solution 飽和苦味酸緩沖液 500克 IND
Sarcosine Oxidase 肌氨酸氧化酶 5克 BR,5u/ul,99%
Sarcosine methyl ester HC1 N-甲基氨基乙酸甲酯鹽酸鹽 5克 BR,99%
Sarcosine ethyl ester HC1 N-甲基氨基乙酸乙酯鹽酸鹽 1克 BR,99%
SAHH S-腺苷高半*水解酶 100毫克 BR,20u/ul
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