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上海撫生實業有限公司
雜交瘤細胞株;C12D1培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
產品名稱 | 雜交瘤細胞株;C12D1培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 雜交瘤細胞株;C12D1培養
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
雜交瘤細胞株;C12D1培養復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
雜交瘤細胞株;C12D1培養操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
5-Hydroxymethylfurfural 5-羥甲基-2-呋喃甲醛 5克 4N
5′- CMP 5′- 胞苷酸 15KU BR,99%
52-Ketobutyric acid 2-氧代丁酸 50毫克 高純,99%
2iP Riboside 異戊烯基腺嘌呤核苷 20毫克 超純,99%
2x2-Aminoisobutyric Acid DL-α-氨基異丁酸 5克 BR,98%
2-Aminofluorene 2-芴胺 25克 CP
2-Aminodiphenyl 鄰氨基聯苯 100毫升 AR,99%
2-Aminobenzothiazole 2-苯并噻唑胺 500克 CP,98%
2-Aminobenzimidazole α-氨基間二氮茚 100克 AR,99.5%
2-Ami-phenylethanol 2-氨基-1-苯基乙醇 5克 BR,98%
2-Acetylpyridine 甲基-2-吡啶基酮 500克 CP,99%
24-Epicastasterone 蕓苔素內酯 10毫克 試劑級,98%
2′-O-Methyl-Uridine 2'-O-甲基尿苷 1克 高純,99%
2′-Du 2′-脫氧尿甙 5克 精制級,99%牛雌激素(E)ELISA Kit ,英文名: Bovine Estrogen,E ELISA Kit ,規格: 48T/96T
牛成纖維細胞生長因子23(FGF23)ELISA Kit ,英文名: Bovine Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit ,規格: 48T/96T
牛成纖維細胞生長因子21(FGF21)ELISA Kit ,英文名: Bovine fibroblast growth factor 21,FGF21 ELISA kit ,規格: 48T/96T
牛長鏈脂酰CoA脫氫酶(ACADL)ELISA Kit ,英文名: Bovine acyl-Coenzyme Adehydrogenase,long chain(ACADL)ELISA kit ,規格: 48T/96T
牛草酰乙酸ELISA Kit ,英文名: Bovine oxaloacetic acid ELISA kit ,規格: 48T/96T
牛布魯氏桿菌抗體(IgM)ELISA Kit ,英文名: Bovine brucella antibody(IgM)ELISA kit ,規格: 48T/96T
牛布魯氏桿菌抗體(IgG)ELISA Kit ,英文名: Bovine Brucella antibody IgG ELISA kit ,規格: 48T/96T
雜交瘤細胞株;C12D1培養牛補體片斷5a(C5a)ELISA Kit ,英文名: Bovine complement fragment 5a,C5a ELISA kit ,規格: 48T/96T
牛丙二酸單酰*(malonyl CoA)ELISA Kit ,英文名: Bovine malonyl coenzyme A ELISA kit ,規格: 48T/96T
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