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上海撫生實業有限公司
小鼠骨髓雜交瘤細胞;6E11培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
產品名稱 | 小鼠骨髓雜交瘤細胞;6E11培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 小鼠骨髓雜交瘤細胞;6E11培養
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 未定
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
小鼠磷酸化表皮生長因受體(pEGFR)免疫試劑盒 Mouse phosphorylated epidermal growth factor receptor,pEGFR ELISA kit
小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)免疫試劑盒 Mouse phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,P-JNK ELISA kit
小鼠淋巴細胞趨化因(Lptn/LTN/XCL1)免疫試劑盒 Mouse lymphotactin,Lptn/LTN ELISA Kit
小鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)免疫試劑盒 Mouse lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit
小鼠*腦啡肽(Leu-ENK)免疫試劑盒 Mouse Leu-Enkephalin,Leu-ENK ELISA Kit
小鼠可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)免疫試劑盒 Mouse Soluble Toll-like Receptor 9,sTLR9/sCD289 ELISA Kit
小鼠可溶性Toll樣受體4(sTLR4)免疫試劑盒 Mouse Soluble Toll-like Receptor 4,sTLR4 ELISA Kit鉻酸鈉 shēng huà shì jì 容量: 100克
鉻酸鉀 shēng huà shì jì 容量: 保存:-20℃ 1克
鉻酸鋇 shēng huà shì jì 容量: RT 500毫升
鉻酸銨 shēng huà shì jì 容量: 1克
鉻片 shēng huà shì jì 容量: 1克
鉻粒 shēng huà shì jì 容量: 50克
鉻藍黑R shēng huà shì jì 容量: 10克
鉻黑T shēng huà shì jì 容量: 5克
鉻粉 shēng huà shì jì 容量: 250毫克
肝素抗凝管 shēng huà shì jì 容量: RT 支
肝浸粉(牛) shēng huà shì jì 容量: 2~8℃,避光 1克
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