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上海撫生實業有限公司
大鼠腦膠質瘤細胞;C6培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 大鼠腦膠質瘤細胞;C6培養
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 C6是由Benda等用N-亞硝基甲脲誘導的大鼠膠質瘤克隆,并經過一系列的體外培養和動物傳代交替后建成的。該細胞表達S-100;產生生長激素;糖皮質激素作用下可以產生磷酸甘油脫氫酶。當細胞從低密度生長至回合狀態時,S-100產量增加10倍。
培養條件 F10: Ham's F10 Nutrient Mixture 2.5%FBS+15%HS
傳代方法 1:2~1:3傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 P50
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
產品名稱 | 大鼠腦膠質瘤細胞;C6培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
DL-a-*(+4℃) DL-ALPHA-GLYCEROPHOSPHATE DISODIUM SALT 3325-00-6
維生素 E Vitamin E
生育酚乙酸酯 DL-ALPHA-TOCOPHEROL ACETATE PH EUR 7695-91-2
DL-β苯* 3-Amino-3-phenylpropionic acid 614-19-7
DL-氨基丙醇 DL-Alaninol 6168-72-5
DL-白氨酸 DL-2-Amino-4-methylpentanoic acid 328-39-2
DL-丙氨酰-DL-*(-20℃) DL-ALANYL-DL-ALANINE 2867-20-1
DL-甘油醛 ≥90% (GC) DL-GLYCERALDEHYDE 56-82-6
DL-蛋氨酸 DL-Methionine 59-51-8
DL-*;DL-α-*;1,2-二硫戊環-3-戊酸;DL-6,8-二硫代辛酸;α-硫脂酸;二* DL-Thioctic acid;1,2-Dithio lane-3-valeric acid; 1,2-Dithiolane-3-pentanoic acid; DL-α-Lipoic acid; α-Lipoic acid; 5-(1,2-Dithiolan-3-yl)valeric acid; 5-[3-(1,2-Dithiolanyl)]pentanoic acid;δ-[3-(1,2-Dithiacyclopentyl)]pentanoic acid; DL-6,8-Dithiooctanoic 1077-28-7
DL-*鹽酸鹽 DL-Ornithine hydrochloride 1069-31-4
DL-*;DL-胰化蛋白氨基酸;DL-色氨基酸;DL-2-氨基-3-吲哚基-1-丙酸;DL-氨基吲哚丙酸 DL-Tryptophan ;DL-2-AMino-3-indolepropionic acid;DL-2-AMino-3-indolylpro-panoic acid;DL-β-3-Indolyl alanine;(±)-2-AMino-3-(3-indolyl)propionic acid 1954/12/6人類泛素蛋白ISG15 免疫試劑盒 Human ubiquitin-like modifier(ISG15)ELISA kit
人類白細胞抗原G(HLA-G)免疫試劑盒 Human HLA-G ELISA Kit
人類白細胞抗原E(HLA-E)免疫試劑盒 Human HLA-E ELISA Kit
人類白細胞抗原B27(HLA-B27)免疫試劑盒 Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA Kit
人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)免疫試劑盒 Human mammalian target of rapamyein,mTOR ELISA Kit
人酪氨酰tRNA合成酶(YARS)免疫試劑盒 Human tyrosyl-tRNA synthetase,YARS ELISA kit
人酪氨酰DNA 磷酸二酯酶1(TDP1)免疫試劑盒 Human Tyrosyl-DNA Phosphodiesterase 1,TDP1 ELISA Kit
人*羥化酶(TH)免疫試劑盒 Human tyrosine hydroxylase,TH ELISA Kit
人*激酶2(Tyk-2)免疫試劑盒 Human tyrosine kinase2,Tyk-2 ELISA Kit
人*蛋白激酶受體TYRO3(TYRO3)免疫試劑盒 Human TYRO3 ELISA Kit
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