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上海撫生實業有限公司
正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。
【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
產品名稱 | 正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F培養 |
貨期 | 3-5天 |
發貨地 | 上海 |
細胞名稱 正常大鼠腎細胞(EGF受體陽性);NRK49F培養
形態特性 多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 EGF受體陽性
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 2~3天傳代一次;切忌長滿,有接觸性抑制
傳代情況 P13
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
L-(+)-苯* L-Phenylglycine 2935-35-5
L-扁桃酸 (S)-(+)-Mandelic acid 17199-29-0
L-*芐酯對甲苯磺酸鹽 L-Alanine benzyl ester 4-toluenesulfonate 42854-62-6
L-脯氨醇 L-(+)-Prolinol 23356-96-9
L-*芐酯鹽酸鹽 L-Proline benzyl ester hydrochloride 60668-01-1
L-*甲酯鹽酸鹽 Methyl L-prolinate hydrochloride 2133-40-6
L-高苯* L-Homophenylalanine 943-73-7
L-高*硫內酯鹽酸鹽 L-HOMOCYSTEINE THIOLACTONE HYDROCHLORIDE 31828-68-9
L-*鈉鹽 L(+)-Monosodium glutamate monohydrate 6106/4/3
γ-L-谷氨酰基-4-硝基苯胺 GAMMA-L-GLUTAMYL-4-NITROANILIDE 7300-59-6
L-環己基* L-alpha-Cyclohexylglycine 14328-51-9
L-環戊基* L-CYCLOPENTYL GLYCINE 2521-84-8人抗組織轉*酶(tTG)抗體(IgA)免疫試劑盒 Human Anti-tissue transglutaminase(tTG)antibody(IgA)ELISA kit
人抗組蛋白抗體(AHA)免疫試劑盒 Human anti-Histone antibody,AHA ELISA Kit
人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體免疫試劑盒 Human histone H2A-H2B-DNA autoantibody ELISA Kit
人抗組氨?;鵷RNA合成酶,細胞質(HARS)抗體免疫試劑盒 Human HARS antibody ELISA kit
人抗宮內膜抗體(EMAb)免疫試劑盒 Human Endometrium Antibody,EMAb ELISA Kit
人抗滋養膜細胞抗體(ATA)免疫試劑盒 Human anti-trophoblast antibody,ATA ELISA Kit
人抗著絲點抗體(ACA)免疫試劑盒 Human Anti-centromere Antibody,ACA ELISA kit
人抗轉*酶抗體(IgG)免疫試劑盒 Human Transglutaminase 6 antibody IgG ELISA Kit
人抗轉*酶抗體(IgA)免疫試劑盒 Human Transglutaminase 6 antibody IgA ELISA Kit
人抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)免疫試劑盒 Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit
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